IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

【中文縮寫】    IEC-6細(xì)胞

        【中文名稱】    IEC-6(大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞)

        【背景資料】    皮質(zhì)醇可抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng),。該細(xì)胞表達(dá)腸上皮*抗原,，在20代以前保持恒定的生長(zhǎng)速度和細(xì)胞形態(tài),，此后生長(zhǎng)速度迅速下降,，細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生改變。 

        【產(chǎn)品來(lái)源】    細(xì)胞主要來(lái)源ATCC,、DSMZ,、ECACC、RIKEN,、promocell,、ScienCell、ECACC,、JCRB,、KCLB、Asterand,、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系

      提供貼壁,、半貼壁、懸浮,、半懸浮,、貼壁與懸浮混合等細(xì)胞特性，一般細(xì)胞培養(yǎng)PBS量是10%,，如果出現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不良情況,，可以提高PBS量到15%，待細(xì)胞穩(wěn)定后,，調(diào)回PBS量10%,，對(duì)于初次實(shí)驗(yàn)者，一般細(xì)胞培養(yǎng),，都需要加入雙抗防止細(xì)胞污染,，細(xì)胞匯合度達(dá)到90%，我們開始寄送,，這樣可以保持細(xì)胞收到時(shí),，良好的細(xì)胞活力。復(fù)蘇細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1收到細(xì)胞后當(dāng)天換液,，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,，放進(jìn)培養(yǎng)箱，第二天再消化,。

2邊觀察邊消化,，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài),，終止消化時(shí)間，采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,，如可吹打下來(lái),，即終止消化?？蛻裘鞅容^好的消化時(shí)間,。

3隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說(shuō)明書，請(qǐng)客戶仔細(xì)查看,。

4記得加1%雙抗,，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,，以備后用,。

5售后時(shí)間為一周，僅限于細(xì)胞本身的質(zhì)量問(wèn)題,，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作,，消化過(guò)度，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細(xì)胞問(wèn)題不在售后范疇,。

6收到細(xì)胞后,，如細(xì)胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系,，以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),，請(qǐng)您務(wù)必重視,。

7剛收到細(xì)胞時(shí)，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調(diào)回10%即可,。

（其中1,2條針對(duì)于貼壁細(xì)胞,，懸浮細(xì)胞詳情請(qǐng)見(jiàn)細(xì)胞操作說(shuō)明書）

        【產(chǎn)品】    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

        【產(chǎn)品規(guī)格】    1*10（6）

        【安全級(jí)別】    1

        【產(chǎn)品種屬】    大鼠

        【組織來(lái)源】    小腸隱窩

        【細(xì)胞形態(tài)】    上皮細(xì)胞樣

        【細(xì)胞特性】    貼壁

        "細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇和使用：

MEM：成分簡(jiǎn)單，貼壁細(xì)胞

DMEM：分高糖型和低糖型,。

IDMEM：適合細(xì)胞密度低,，生長(zhǎng)困難的細(xì)胞。如雜交細(xì)胞的篩選,，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng),。

RPM1640：應(yīng)用*泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞,，也適合其他細(xì)胞,。

199、109培養(yǎng)基：成分齊全,，培養(yǎng)效果較好,。

F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng)。

F12培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無(wú)血清培養(yǎng),。

McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng),。"    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

        【細(xì)胞】    細(xì)胞不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌

        【培養(yǎng)條件】    詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

        【傳代方法】    建議1:2-1:3 兩天換液一次

        【凍存條件】    詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書

        【主要文獻(xiàn)】    請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

傳代操作步驟：

一、貼壁細(xì)胞傳代

1.提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)。

2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,。

3.加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用,。

4.胞用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,。

5.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。

二、懸浮細(xì)胞傳代

1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,。

2.棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液,。

3.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

培養(yǎng)的過(guò)程中，經(jīng)常見(jiàn)到黑色的顆?；蛐『邳c(diǎn),，這種情況是怎么引起的呢？該怎么避免呢,？原因：

黑點(diǎn),，大概有細(xì)胞本身帶的，環(huán)境有的,，還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基

1,、如果小黑點(diǎn)有增殖趨勢(shì)，那么就有可能是污染了,，需要處理,；

2、如果小黑點(diǎn)沒(méi)有增殖趨勢(shì),，且不影響細(xì)胞生長(zhǎng),，也不影響實(shí)驗(yàn)的話，則可能

 a,、是“黑膠蟲”,，黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭(zhēng)議,。有人認(rèn)為是從血清中來(lái)的一種原蟲,，也有人認(rèn)為是細(xì)菌，或是真菌,，也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶,。“黑膠蟲”可寄生于動(dòng)物細(xì)胞，也可以生存于培養(yǎng)基中,，依靠細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)為生,，并隨細(xì)胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng),，開始時(shí)對(duì)細(xì)胞并沒(méi)有什么影響,，但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時(shí)候,， 細(xì)胞生長(zhǎng)就會(huì)受到影響直至死亡，嚴(yán)重影響了科研活動(dòng)的開展和進(jìn)行,。以前（這個(gè)至少是10年以前）,，很多實(shí)驗(yàn)室在養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用國(guó)產(chǎn)血清，那時(shí)的血清可能質(zhì)量不過(guò)關(guān),，有所謂的“黑膠蟲”,，但是也沒(méi)有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清,，即使國(guó)產(chǎn)的,，產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見(jiàn)了。

 b,、是細(xì)胞碎片,，或血清里德沉淀析出，在做布朗運(yùn)動(dòng),。

 c,、是核糖體，也可能是雜質(zhì)ZYC3153    人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞    SK-NEP-1    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3154    人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞    786-O [786-0]    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3155    人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞    Caki-1    形態(tài)：貼壁，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3156    人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞    ACHN    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3157    人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞    HEC-1-A    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3158    人絨毛膜癌細(xì)胞    JEG-3    形態(tài)：貼壁，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3159    人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞    EA.ZY926    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3160    人膀胱癌細(xì)胞    5637    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3161    人輸尿管上皮永生化細(xì)胞    SV-HUC-1    形態(tài)：貼壁，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3162    人滑膜肉瘤細(xì)胞    SW 982 [SW-982, SW982]    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3163    人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞    T24    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3164    人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞    HuT 78    形態(tài)：貼壁,，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3165    人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞    COLO 320DM     形態(tài)：貼壁,，懸浮均有,；上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS