HO8910人卵巢癌細(xì)胞

細(xì)胞規(guī)格：1.2*10∧5

細(xì)胞形態(tài)： 細(xì)胞株 

生長特性：貼壁 懸浮 半貼壁
傳代時間：2-3天 3-5天 
傳代比例：1:2~1:3  1:1~1:2
培養(yǎng)條件：DMEM+10%/胎牛血清,，37℃，5%CO2
凍存條件：常規(guī)培養(yǎng)基,，20%FBS,，10%DMSO
 傳代方法：細(xì)胞*匯合時，倒掉舊液,，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化,，顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個細(xì)胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶,，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃,，5%CO2孵箱培養(yǎng),。

郵購備注： 收到細(xì)胞后，請鏡下觀察細(xì)胞,，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞,。若有懸浮的細(xì)胞，請離心收集細(xì)胞,，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中,。使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清,，剛接到細(xì)胞時血清濃度可以在15％,。

HO8910人卵巢癌細(xì)胞
貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基，第二天再進(jìn)行消化處理
2.如果細(xì)胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),，請將懸浮的細(xì)胞即時離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,，培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化,，重懸打散細(xì)胞,，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加適量0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時間）
2.鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰酶,，加6~8ml *培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落,，吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)作或者凍存