H9人T淋巴瘤細(xì)胞

細(xì)胞縮寫(xiě)： H9人T細(xì)胞

    細(xì)胞名稱：   H9人T(淋巴瘤細(xì)胞)

    細(xì)胞來(lái)源：    細(xì)胞主要來(lái)源ATCC,、DSMZ、ECACC,、RIKEN,、promocell、ScienCell,、ECACC,、JCRB、KCLB,、Asterand,、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系

    "購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)細(xì)胞了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜，隔天再取出觀察,。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次,。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流,。"    規(guī)格：    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

H9人T淋巴瘤細(xì)胞

 "細(xì)胞培養(yǎng)三不要：

養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功,。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下：

1. 不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,，覺(jué)得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎,？燒瓶口燒的,。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候,，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi),。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷,，壓力驟降,，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來(lái),。培養(yǎng)基中的碳酸少了,，當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話,，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢,。細(xì)胞（當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿，因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高）

其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼。如果有細(xì)菌的話,，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細(xì)菌，除非把瓶口和塞子燒紅,。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口,。來(lái)美國(guó)以后發(fā)現(xiàn)這里更*，超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈,。

2. 不要頻繁看細(xì)胞,。對(duì)于初學(xué)者而言，養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看,。細(xì)胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看,。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處,，特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的,。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍,，形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞，細(xì)胞老是長(zhǎng)不好,。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,，細(xì)胞瘋長(zhǎng)。

3. 不要怕消化,。在傳代的時(shí)候,，初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度，早早地終止消化,。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈,，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來(lái),，用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候，37度消化過(guò)夜,，細(xì)胞也沒(méi)事,。我一般是等細(xì)胞*變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái),。還有,，動(dòng)作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡,。

細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：

無(wú)菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,，超凈臺(tái)以紫外燈照射30分鐘滅菌，以70 % ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,，并開(kāi)啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。
每次操作只處理一株細(xì)胞株,，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染,。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),，以70 % ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,。
無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架,、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置,，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以70%乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi),。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域,，一般勿在邊緣區(qū)域操作。
小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品,，避免造成污染,。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn),。容器打開(kāi)后,，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約 45°角取用,，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面,。
選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的,。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基,。
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃冰箱全溶后再分裝,，在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一,，減少沉淀的發(fā)生,。勿直接由–20℃直接至37℃ 解凍，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。
熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍之血清,。水浴鍋升到56℃后,，將血清放入，待溫度升高到56℃后計(jì)時(shí),，一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次,。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,，一般不要作此熱處理,，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清（包括不同批次）對(duì)細(xì)胞的影響