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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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該細(xì)胞公司*,，培養(yǎng)狀態(tài)下的,，現(xiàn)貨一周供應(yīng),，我公司可100%保障該細(xì)胞的質(zhì)量，代數(shù)年輕活性好,，不含有細(xì)菌,、真菌、病毒（HIV,、HBV,、HCV）、支原體 ,。
產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
h22小鼠腹水肝癌細(xì)胞
細(xì)胞縮寫： H22細(xì)胞 細(xì)胞名稱： H22(小鼠腹水肝癌細(xì)胞) 詳細(xì)背景： 該細(xì)胞系分離自小鼠腹水,，由大連醫(yī)科學(xué)院建立。 細(xì)胞來源： 細(xì)胞主要來源ATCC,、DSMZ,、ECACC、RIKEN,、promocell,、ScienCell、ECACC,、JCRB,、KCLB、Asterand,、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系 "購買細(xì)胞注意事項： 1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。 2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,。 3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察,。細(xì)胞系此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常,，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系,，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次,。 4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通交流,。" P4 規(guī)格： 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支） 細(xì)胞規(guī)格： 1*10(5)/ml——1*10（6）/ml 安全水平： 1 細(xì)胞種屬： 小鼠 組織來源： 腹水 肝癌 細(xì)胞形態(tài)： 淋巴母細(xì)胞 細(xì)胞特性： 懸浮 細(xì)胞融合度： 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） 細(xì)胞： 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌 |
h22小鼠腹水肝癌細(xì)胞
操作步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%,，細(xì)胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
注意事項：
1.動作要快，胰酶消化，換液什么,，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好,。另外，要掌握好胰酶消化時間,，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,，很多時候是傳代的原因。
3.有時間的話,，需要細(xì)胞計數(shù),，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,，不會臨時要處理,，手足無措。
3.要做什么心里要非常清楚,，合理安排時間,，細(xì)胞房的實驗穿插進(jìn)行,，可以節(jié)省很多時間,，也不會耽誤別人的實驗。
4.個人的實驗器具自己收一套,，不要和別人混用,，zui近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染,，馬上丟,。
5.細(xì)胞房不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾,。
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