chang liver人張氏肝細(xì)胞

【產(chǎn)品商標(biāo)】ATCC
【供應(yīng)限制】僅供科研使用  
細(xì)胞培養(yǎng)的準(zhǔn)備工作一定要做充分,，準(zhǔn)備至少兩套高溫高壓消毒后的物品,，做新的操作時先檢點(diǎn)所有的東西是否準(zhǔn)備齊全，比如配液時的濾器,，分裝所用的容器是不是足夠等等,。所有實(shí)驗(yàn)物品，包括自己配的液體和購買的產(chǎn)品,，都要標(biāo)記清楚（比如名稱,，PH值、時間,、還有自己的名字,，如果是共用一個冰箱的話這一點(diǎn)很重要）。凍存的物品盡量避免反復(fù)凍融,，如果無法避免,，也要盡早分裝，一次用完,。細(xì)胞計數(shù)在開始培養(yǎng)時很有必要,，但計數(shù)次數(shù)多了經(jīng)驗(yàn)估計法也是很好的辦法，必竟每次計數(shù)也不是那么精確,，而細(xì)胞培養(yǎng)對計數(shù)也不是那么要求嚴(yán)格,。 一瓶細(xì)胞培養(yǎng)用液體盡量不要反復(fù)使用，這將增大污染機(jī)率,?？捎玫霓k法即是將其分裝成適當(dāng)規(guī)格，一次用1瓶,。細(xì)胞培養(yǎng)板或瓶若要摞在一起的話,，注意在箱內(nèi)不要超過3層，否則,，中間的會受熱不均,，嚴(yán)重影響細(xì)胞質(zhì)量,，可造成細(xì)胞生長不均勻，可能造成中間稀少,，四周密集,。
本公司是一家生物企業(yè)，滿足生物化學(xué),、分子生物學(xué) ,、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué) ELISA試劑盒等生物科技實(shí)驗(yàn)需求,，其主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒/人ELISA試劑盒/大鼠ELISA試劑盒/小鼠ELISA試劑盒/金標(biāo)試劑盒/免疫組化試劑盒/標(biāo)準(zhǔn)品/科研抗體/生化試劑,，生物培養(yǎng)基/細(xì)胞株/實(shí)驗(yàn)室耗材/動物血清等科研產(chǎn)品！

chang liver人張氏肝細(xì)胞

1)培養(yǎng)瓶有破裂,，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染,，所以我們會及時安排幫老師解決；2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,，細(xì)胞生長至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代,；如細(xì)胞還是不貼壁,，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),，中間注意觀察,，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決,；3)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,，或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度；4)對于生長不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,，而旁邊則為一塊空白),，此時可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重新打散,，貼壁,，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),。
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染,。所有操作盡量靠近酒精燈火焰,。每次進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材,；②每天觀察細(xì)胞形態(tài),，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好,，生長致密時即可傳代,；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施,，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液,、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn),。對每一個細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作,。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù),。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的,。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融,。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟：1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液,。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,，加入少量新培養(yǎng)液,。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液,。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理,。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘),；2)去上清液,，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預(yù)冷15分鐘后,，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為5×106～1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢,？答案是不一定的,，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,，每管0.25ml,。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,，同時作好登記(日期,、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù)),；4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,，-80℃冰箱過夜。,；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,，2h;-80℃,，2h;放入液氮罐；5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,，但為妥善起見,，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),，觀察生長情況,，然后再繼續(xù)凍存。