C6大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

細(xì)胞名稱：大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞,；C6
組織來源：膠質(zhì)瘤細(xì)胞
形態(tài)：貼壁；成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞來源：：由Benda等用N-nitrosomethylurea誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆,，并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動(dòng)物傳代交替后建成的,。該細(xì)胞表達(dá)S-100；產(chǎn)生生長激素,；糖皮質(zhì)激素作用下可以產(chǎn)生磷酸甘油脫氫酶,。當(dāng)細(xì)胞從低密度生長到滿瓶時(shí)，S-100產(chǎn)量增加10倍,。
我們有細(xì)胞庫和專業(yè)實(shí)驗(yàn)室無菌操作,，同時(shí)接受客戶復(fù)蘇、委托培養(yǎng)服務(wù),，并提供的科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù),。購買我司細(xì)胞的客戶請先與公司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的細(xì)胞株名稱、種屬,、貨號,、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式,。向銷售人員索取細(xì)胞株說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作,。
對于培養(yǎng)，只要我們細(xì)心操作,，注意細(xì)節(jié),，并不是大家說的那樣困難。對于有經(jīng)驗(yàn)和有條件的客戶,，我們提供專人指導(dǎo),。對于無培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)和條件的客戶，建議由公司代為培養(yǎng)細(xì)胞及進(jìn)行后續(xù)研究,。我司對每一位客戶追蹤服務(wù),，因材施教，對產(chǎn)品不僅售前負(fù)責(zé),，售后更負(fù)責(zé),。

C6大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

1)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染,，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決,；2)細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封,，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱,。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,，表明細(xì)胞活力正常,，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,，細(xì)胞生長至匯合度80%,，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁,，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察,，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),，直到問題解決；3)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,，或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度,；4)對于生長不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白)，此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,，重新打散,，貼壁，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代,；每周換液2-3次。
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染,。所有操作盡量靠近酒精燈火焰,。每次進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材,；②每天觀察細(xì)胞形態(tài),，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好,，生長致密時(shí)即可傳代,；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施,，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液,、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn),。對每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作,。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù),。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲存時(shí)間幾乎是無限的,。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融,。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟：1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液,。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,，加入少量新培養(yǎng)液,。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液,。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理,。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)；2)去上清液,，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基,，于4℃預(yù)冷15分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,，細(xì)胞濃度為5×106～1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢,？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇,；3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次,、凍存支數(shù)),；4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過夜,。,；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在4℃,，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,，2h;-80℃，2h;放入液氮罐,；5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,，但為妥善起見，凍存半年后,，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存,。