BON-1人胰腺癌細胞

庫存狀態(tài):現(xiàn)貨

細胞規(guī)格:株

質(zhì)控標準:無支原體、無污染,、符合標準

運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸,。

全國范圍內(nèi)免費快遞運輸，如出現(xiàn)運輸質(zhì)量問題,，我們可以包退換貨,。

BON-1人胰腺癌細胞

1)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染,，所以我們會及時安排幫老師解決；2)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,，如細胞大部分又貼回瓶底,，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉,，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代,；如細胞還是不貼壁,，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),，中間注意觀察,，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),，直到問題解決；3)對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度,；4)對于生長不均的貼壁細胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白),，此時可將細胞進行消化,，重新打散，貼壁,，加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng),。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次,。
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染,。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次進行一種細胞的操作,。每種細胞使用一套器材,；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿,，折光性好,，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象,，應(yīng)立即采取措施,，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救,，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基,。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液,、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點,，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作,。培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,，儲存時間幾乎是無限的,。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟：1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,，在凍存前一天換液,。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化,。適時去掉胰蛋白酶,，加入少量新培養(yǎng)液,。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液,。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理,。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘),；2)去上清液,，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預(yù)冷15分鐘后,，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為5×106～1×107/mL之間,。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢,？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇,；3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,，并標記好細胞名稱和凍存日期,，同時作好登記(日期、細胞種類及代次,、凍存支數(shù)),；4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過夜,。,；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在4℃,，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,，2h;-80℃，2h;放入液氮罐,；5)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見,，凍存半年后,，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況,，然后再繼續(xù)凍存,。