供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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該細(xì)胞公司*,培養(yǎng)狀態(tài)下的,現(xiàn)貨一周供應(yīng),我公司可100%保障該細(xì)胞的質(zhì)量,,代數(shù)年輕活性好,不含有細(xì)菌,、真菌,、病毒(HIV、HBV,、HCV),、支原體 。
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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn) |
更新時(shí)間:2024/07/28 12:50:54瀏覽次數(shù):1508
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BGC-823人胃腺癌細(xì)胞(低分化)
當(dāng)密度達(dá)到傳代密度且細(xì)胞活性在90%以上時(shí),,可以凍存細(xì)胞,在超凈臺(tái)中將要凍存的細(xì)胞移入離心管,,1000rpm離心5min,,棄上清,用90%培養(yǎng)液+10%DMSO的混合液重懸細(xì)胞,,并調(diào)整細(xì)胞密度為4-6×106/ml,,將細(xì)胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。
含量:>1x106 個(gè)/mL,, 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
培養(yǎng)基:RPMI-1640(GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),,90%;胎牛血清,,10%,。 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,。
生長特性:貼壁生長
污染:支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇,;(2)存活細(xì)胞,,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
BGC-823人胃腺癌細(xì)胞(低分化)
傳代操作步驟:
一,、貼壁細(xì)胞傳代
1.提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),。
2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞。
3.加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,。
5.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
二,、懸浮細(xì)胞傳代
1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min。
2.棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液。
3.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)的過程中,,經(jīng)常見到黑色的顆?;蛐『邳c(diǎn),這種情況是怎么引起的呢,?該怎么避免呢,?原因:
黑點(diǎn),大概有細(xì)胞本身帶的,,環(huán)境有的,,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基
1、如果小黑點(diǎn)有增殖趨勢,,那么就有可能是污染了,,需要處理;
2,、如果小黑點(diǎn)沒有增殖趨勢,,且不影響細(xì)胞生長,也不影響實(shí)驗(yàn)的話,,則可能
a,、是“黑膠蟲”,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,,本身就存在爭議,。有人認(rèn)為是從血清中來的一種原蟲,也有人認(rèn)為是細(xì)菌,,或是真菌,,也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶。“黑膠蟲”可寄生于動(dòng)物細(xì)胞,,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,,并隨細(xì)胞傳代而傳代,。“黑膠蟲”與細(xì)胞競爭性生長,開始時(shí)對細(xì)胞并沒有什么影響,,但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時(shí)候,, 細(xì)胞生長就會(huì)受到影響直至死亡,嚴(yán)重影響了科研活動(dòng)的開展和進(jìn)行,。以前(這個(gè)至少是10年以前),,很多實(shí)驗(yàn)室在養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用國產(chǎn)血清,那時(shí)的血清可能質(zhì)量不過關(guān),有所謂的“黑膠蟲”,,但是也沒有明確的鑒定,。但是現(xiàn)在的血清,即使國產(chǎn)的,,產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見了,。
b、是細(xì)胞碎片,,或血清里德沉淀析出,,在做布朗運(yùn)動(dòng)。
c,、是核糖體,,也可能是雜質(zhì)ZYC3194 人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Ca Ski 形態(tài):貼壁,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3195 人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) HCC 94 [HCC941122] 形態(tài):貼壁,,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3196 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-B 形態(tài):貼壁,,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3197 人卵巢癌細(xì)胞 SK-OV-3 形態(tài):貼壁,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3198 人卵巢透明細(xì)胞癌 ES-2 形態(tài):貼壁,,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3199 人乳腺癌細(xì)胞 HCC1937 形態(tài):貼壁,,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3200 人胎盤絨毛癌細(xì)胞 JAR 形態(tài):貼壁,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3201 人羊膜細(xì)胞 WISH 形態(tài):貼壁,,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3202 人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞 HBL-100 形態(tài):貼壁,,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3203 人乳腺癌細(xì)胞 Hs 578T 形態(tài):貼壁,懸浮均有,;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3204 人乳腺癌細(xì)胞 MCF7 [MCF-7] 形態(tài):貼壁,,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
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