GIBCO16010-159新生牛血清

小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?

來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

組份與比例不同：兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,，使用濃度不同，一般在5%-10%,，有特殊要求的濃度在20%,。

GIBCO16010-159新生牛血清

 如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

將血清從冷凍箱取出后,，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此,，推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清，并避免反復(fù)凍融,。

我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃,。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月,。若一次無(wú)法用完一瓶,，建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍,。

 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,，可長(zhǎng)期保存嗎?

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。

細(xì)胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,，首先,，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后,，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,，微生物則會(huì)大量繁殖,，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染,、支原體污染等。

如果在鏡下觀察細(xì)胞,，生長(zhǎng)狀態(tài)良好,，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化,，那么,，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過老,，破碎的細(xì)胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,，不宜細(xì)胞生長(zhǎng);

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格?？蓱?yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);

(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì),，多次傳代可以消除,。

 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴,。

(3) 培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2,。

(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗,。

(5) 掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。