Noverse優(yōu)等胎牛血清

適合用于常規(guī)細胞原代細胞的培養(yǎng)
內(nèi)毒素含量極低 <3EU/ml(規(guī)定：特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ，適合各種細胞培養(yǎng)
七次無菌過濾,，zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細菌,、真菌、支原體,、病毒及病毒抗體檢測,，符合動物協(xié)會要求

Noverse優(yōu)等胎牛血清

 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。

長時間儲存在2-8℃時,，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此，推薦在-20℃以下儲存血清,，并避免反復(fù)凍融,。

我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,，請勿超過一個月,。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。

2,、血清中包含絮狀沉淀，它們是什么,，怎么處理?

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀,，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解,。所以,，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失,。

 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

(1)解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生,。

(2) 血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一,。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁,，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,，從而影響血清的品質(zhì)。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要,，可以無須做此步驟。

(6) 若必須做血清的熱滅活,，請遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,，可長期保存嗎?

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解,。

 為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮,，細胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué) 研究,，培養(yǎng)ES細胞,、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清,。

 有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,，而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,，沉淀物的形成會顯著的增多,，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”,，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多,，使研究者誤認為是微生物 的分裂擴增,。

若非必須，可以不需要做熱處理這一步,。不但節(jié)省時間,，更確保血清的質(zhì)量!

細胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先,，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),，黑點是否游動,。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖,，培養(yǎng)基就會迅速變黃,、變混濁,。污染包括細菌污染、支原體污染等,。

如果在鏡下觀察細胞,，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比,，沒有任何變化,，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細胞生長過老,，破碎的細胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好,，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,。可應(yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點;

(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除,。

 細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。

(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。

(3) 培養(yǎng)基保持PH值7.0- 7.2,。

(4) 嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),，容器定期刷洗。

(5) 掌握細胞傳代的時機,，細胞切勿生長過老,。

小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?

來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛,。

組份與比例不同：兩者所含的促細胞生長因子,、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,，用途與用法不同：某些細胞必需胎牛血清才能生長,，而有些細胞只需小牛血清即可，使用濃度不同,，一般在5%-10%,，有特殊要求的濃度在20%。

血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,，若存放在4℃不可超過一個月,。解凍血清時 ，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解,，然后至室溫放置使之升溫,。不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍,，顏色加深,，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后,，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,，避免反復(fù)凍融。

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適合用于常規(guī)細胞原代細胞的培養(yǎng)
內(nèi)毒素含量極低 <3EU/ml(規(guī)定：特級胎牛血清<10 EU/ml)
極利于細胞的生長和傳代 ,，適合各種細胞培養(yǎng)
七次無菌過濾，zui后三次為0.1 µm無菌過濾處理
進行細菌,、真菌,、支原體、病毒及病毒抗體檢測,，符合動物協(xié)會要求

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚,，且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異,。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、激素,、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的

牛血清是細胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能,。

1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2. 提供結(jié)合蛋白,，能識別維生素,、脂類、金屬和其他激素等,，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用,。

4.是細胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

5.起酸堿度緩沖液作用,。

6.提供蛋白酶抑制劑,，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害,。