關(guān)于胎牛血清的知識
什么是胎牛血清,?
胎牛血清是通過母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,,后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級0.1µm終端微濾方法處理后,常用于細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗,。
胎牛血清的重要性
細胞培養(yǎng)是很多下游實驗的基礎(chǔ),,細胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實驗的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細胞培養(yǎng)的主要試劑對實驗的重要性不言而喻,!
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,,所以IgG含量低,,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),,具有極為重要的功能,。
? 提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,,以及主要的低分子營養(yǎng)物,。
? 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素,、脂類,、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。
? 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,,起到解毒作用。
? 是細胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源,。
? 起酸堿度緩沖液作用。
? 提供蛋白酶抑制劑,,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,,保護細胞不受傷害。
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別,?
根據(jù)牛出生時間和血清采集分離方法分為:
? 胎牛血清(Foetal Bovine Serum,,簡稱FBS):胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未wanquan的胎牛心臟密閉穿刺采血后,,通過一系列工藝處理最終獲得,。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,,一旦胚胎發(fā)育wanquan這些因子會自動消失。
? 新生牛血清(Newborn Calf Serum,,簡稱NBCS):出生14小時內(nèi)未進食的新生牛,,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。
? 小牛血清(Calf Serum):出生后3天至6月齡小牛動脈采血分離血清,。
? 成年牛血清(Adult Bovine Serum,,簡稱ABS)指的是屠宰時收集全血后分離得到血清。
胎牛血清要求:
1,、性狀,、外觀:淺黃色澄清、無溶血,、無異物稍粘稠液體,。
2、蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v)
3,、血紅蛋白含量:≤ 0.02%( w/v)
4,、無菌檢驗:陰性
5、支原體檢驗:陰性
6,、細菌內(nèi)毒素:≤5(EU/ml)
7,、牛腹瀉病毒:陰性
8、大腸桿菌噬菌體:陰性
9,、支持細胞增殖:(Sp2/0-Ag14) 生長曲線 (接種濃度)最大增殖濃度 ≥2.5×106個/ml,,細胞倍增時間:≤15h,克隆率:≥85%