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關(guān)于胎牛血清的知識(shí)
什么是胎牛血清,？
胎牛血清是通過(guò)母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,，經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細(xì)胞,、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,，后經(jīng)生產(chǎn)使用多級(jí)高置流膜過(guò)濾技術(shù)和三級(jí)0.1µm終端微濾方法處理后，常用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn),。
胎牛血清的重要性
細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),，細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定，而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻,！
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,，因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG含量低,，且含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,，故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能,。
? 提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物,。
? 提供結(jié)合蛋白,，能識(shí)別維生素、脂類,、金屬和其他激素等,，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
? 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用,。
? 是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。
? 起酸堿度緩沖液作用,。
? 提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,，保護(hù)細(xì)胞不受傷害,。
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別？
根據(jù)牛出生時(shí)間和血清采集分離方法分為：
? 胎牛血清（Foetal Bovine Serum,，簡(jiǎn)稱FBS）：胎牛血清是指懷孕3-8個(gè)月的母牛被屠宰后,，發(fā)育未wanquan的胎牛心臟密閉穿刺采血后，通過(guò)一系列工藝處理最終獲得,。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,，一旦胚胎發(fā)育wanquan這些因子會(huì)自動(dòng)消失,。
? 新生牛血清（Newborn Calf Serum，簡(jiǎn)稱NBCS）：出生14小時(shí)內(nèi)未進(jìn)食的新生牛,，通常采用頸動(dòng)脈采集血液分離得到的血清,。
? 小牛血清（Calf Serum）：出生后3天至6月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清。
? 成年牛血清（Adult Bovine Serum,，簡(jiǎn)稱ABS）指的是屠宰時(shí)收集全血后分離得到血清,。
胎牛血清要求：
1、性狀,、外觀：淺黃色澄清,、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體,。
2,、蛋白質(zhì)含量：3.5%~5.0%( w/v)
3、血紅蛋白含量：≤ 0.02%( w/v)
4,、無(wú)菌檢驗(yàn)：陰性
5、支原體檢驗(yàn)：陰性
6,、細(xì)菌內(nèi)毒素：≤5(EU/ml)
7,、牛腹瀉病毒：陰性
8、大腸桿菌噬菌體：陰性
9,、支持細(xì)胞增殖：(Sp2/0-Ag14) 生長(zhǎng)曲線 (接種濃度)最大增殖濃度 ≥2.5×106個(gè)/ml,，細(xì)胞倍增時(shí)間：≤15h，克隆率：≥85%