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經典培養(yǎng)基中不同成分的作用及選擇原則
一般實驗室在確定培養(yǎng)基種類后，還會遇到培養(yǎng)基有不同分型的情況,。那么對于經典培養(yǎng)基中不同成分的作用及選擇原則又是什么呢,？請往下看 ～
1.葡萄糖（Glucose）：
作用：細胞生長所需的主要能量來源。
? 如何選擇不同葡萄糖含量的培養(yǎng)基,？
最初的 DMEM 中,，葡萄糖濃度為 1 g/L，現(xiàn)在稱其為低糖型 DMEM,，適合培養(yǎng)多數(shù)哺乳動物細胞,；
高糖型 DMEM 中的葡萄糖濃度為 4.5 g/L，適合生長速度快,，附著性較差的腫瘤細胞,；
使用無糖培養(yǎng)基的主要目的是，通過控制細胞的能量來源,，研究細胞的代謝過程或葡萄糖利用效率
2.HEPES：
作用：pH 緩沖劑,。
是一種氫離子緩沖劑，其作用不依賴于 CO2,；
在一定范圍內對細胞無毒性作用,，能較長時間控制恒定的 pH 范圍，保證細胞良好生長,；
部分細胞對酸堿度的變化非常敏感,，建議使用 HEPES；
根據(jù)需要,，非必需,。
3.L-谷氨酰胺（L-glutamine）：
作用：L-谷氨酰胺是一種氨基酸，細胞的重要能量來源,，參與蛋白質的合成,，也為合成核酸提供碳源,。
? 存在的不足：
L-谷氨酰胺不穩(wěn)定，在中性的水溶液中會自發(fā)降解,；
降解產物氨對細胞有毒性,；
對氨敏感的細胞（如干細胞和原代細胞等）或培養(yǎng)環(huán)境（高密度反應器，無補料的長期培養(yǎng)）不推薦含 L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,。
? 解決方案：
選擇不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基,，在使用前再添加 L-谷氨酰胺，并盡快用完,；
選擇穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物,，如 glutaGRO,。
4.酚紅（Phenol red）：
作用：pH 值的指示劑（中性時為紅色,，酸性時為黃色，堿性時為紫色）,。
? 何時選擇不含酚紅的培養(yǎng)基,？
培養(yǎng)干細胞或細胞克隆時傾向于不加酚紅；
酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素）,；
酚紅的顏色會干擾流式檢測,，不建議使用含酚紅的培養(yǎng)基制備細胞樣品（通常用 PBS）。
5.碳酸氫鈉（Sodium bicarbonate）：
作用：pH 緩沖劑,。
pH 6.8~7.8 為細胞生長的最佳 pH 條件,；
多數(shù)培養(yǎng)基利用碳酸氫鈉進行緩沖；
碳酸氫鈉的緩沖需要 CO2,；
1.高碳酸氫鈉(1.5~3.7 g/L)需要 5~10% CO2 培養(yǎng),；
2.低碳酸氫鈉（0.35 g/L）不需要 CO2 培養(yǎng)。
干粉培養(yǎng)基在配制時需要單獨添加,。
6.丙酮酸鈉（Sodium pyruvate）：
作用：能量來源,。
丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源；
葡萄糖不足的時候,，細胞可以代謝丙酮酸鈉,；
保證細胞更好地生長；
根據(jù)需要,，非必需組分,。