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如何給細胞選擇合適的培養(yǎng)基,？
培養(yǎng)細胞的重要環(huán)節(jié)有很多，其中很重要的一步就是為細胞選擇適合的生長環(huán)境,，為其選擇成分適合又營養(yǎng)豐富的細胞培養(yǎng)基,。細胞培養(yǎng)基是供給細胞營養(yǎng)、維持細胞生長和增殖的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物,，種類一般包括經(jīng)典/基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、無血清培養(yǎng)基以及化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基等,。這其中又以經(jīng)典/基礎(chǔ)培養(yǎng)基最為常用。
經(jīng)典/基礎(chǔ)培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基,，是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計,、配制的培養(yǎng)基,，其主要成分有氨基酸、碳水化合物,、無機鹽,、維生素及其他輔助成分，比如 DMEM,、RPMI 1640、MEM,、DMEM/F12,，這些都是應(yīng)用非常廣泛的經(jīng)典/基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基。
接下來為你詳細介紹一下這些培養(yǎng)基以及適用的細胞類型：
1.RPMI-1640 Medium：
RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物,、特殊造血細胞,、正常或惡性增生的白細胞,，雜交瘤細胞的培養(yǎng),，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng),。其它像K-562,、HL-60、Jurkat,、Daudi,、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用,。
2.Minimum Essential Medium（MEM）：
也稱zd必需培養(yǎng)基,，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,。成分簡單,，可廣泛適應(yīng)各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細胞類型,，而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng),。
3.DMEM-高糖（標(biāo)準(zhǔn)型）：
是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),。適用于附著性較差,，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。
4.DMEM-低糖（標(biāo)準(zhǔn)型）：
是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng),。低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快,、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng),。
5.DMEM/F12：
DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜,，含有多種微量元素,，和DMEM以1:1結(jié)合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基（DME/F12medium）,，作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ),，以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yǎng),。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力,，改良之一是在DMEM/F12（1:1）中加入15mM HEPES緩沖液。
6.McCoy’s 5A：
McCoy’s 5A Medium主要為肉瘤細胞的培養(yǎng)所設(shè)計,，可支持多種（如骨髓,、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長,，除適于一般的原代細胞培養(yǎng)外,，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持,。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞,、人淋巴細胞、HT-29,、BHL-100等上皮細胞,。
7.Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)：
Guilber和Iscove將Dulbecco’Medium改良為Iscove’s Medium，用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體,。此種培養(yǎng)液含有硒,、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES,。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵,。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞，LPS刺激的B細胞,，骨髓造血細胞,，T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,，因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng),。
8.M-199 Medium：
1950年,，Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細胞培養(yǎng)液，即M-199,，主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng),。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞,，并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細胞,。
9.Leibovitz Medium（L-15）:
L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株,。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖,。
10.Ham’s F-10培養(yǎng)基：適應(yīng)小鼠細胞,、人類二倍體的培養(yǎng)。
11.Ham’s F-12培養(yǎng)基：
可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用,，特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),，是無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)液。
12.William’s Medium E：用于大鼠肝上皮細胞的長期細胞培養(yǎng),。
13.MCDB 131培養(yǎng)液：用于培養(yǎng)內(nèi)皮細胞。
14.Opti-MEM I Reduced Serum Media：用于培養(yǎng)造血細胞,。