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胎牛血清價格
一、胎牛血清成分
各項質(zhì)量指標(biāo)符合2005版《中華人民共和國藥典》第三部附錄的要求,。
1,、性狀、外觀 淺黃色澄清,、無溶血,、無異物稍粘稠液體。
2,、蛋白質(zhì)含量 3.5%～5.0%( w/v)
3,、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、無菌檢驗 陰性
5,、支原體檢驗 陰性
6,、細菌內(nèi)毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹瀉病毒 陰性
8,、大腸桿菌噬菌體 陰性
9,、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106 個/ml
細胞倍增時間 ≤15h，克隆率 ≥85%
胎牛血清的主要成分有哪些
1.蛋白質(zhì)類
包括白蛋白、球蛋白,、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用),、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,，減少其毒性和被細胞利用),、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;
2.多肽類
主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子，最主要的生長因子是血小板生長因子,，還有成纖維細胞生長因子,、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等,，雖然在血清中含量很少,，但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;
3.激素類
激素對細胞的作用是多方面的。包括：
胰島素：促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,，與促細胞分裂有關(guān);
類胰島素生長因子：能與細胞表達的胰島素受體結(jié)合,，從而有胰島素同樣的作用：
促生長激素：促進細胞增殖的效應(yīng);
氫化可的松：血清中含有微量該成分，它可能具有促細胞貼附和增殖作用,。但有人證明,，血清中 的氫化可的松，在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導(dǎo)細胞發(fā)生分化的作用,。
4.其他成分
如氨基酸,、葡萄糖、微量元素等,。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯,，與蛋白相結(jié)合的微量元素對細胞生長起促進作用。
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能,。
胎牛血清功能
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物,。
2. 提供結(jié)合蛋白,，能識別維生素、脂類,、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源,。
5.起酸堿度緩沖液作用,。
6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,，保護細胞不受傷害,。
胎牛血清保存方法
1、需要長期保存的澳洲牛血清,，例如澳洲南美胎牛血清,，必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,。切勿將血清在37℃放置太久,，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會被破壞,，而影響血清質(zhì)量,。如果一次無法用完一瓶，可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中,。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,，因此，血清在凍入低溫冰箱前,，必須預(yù)留一定體積空間,，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2,、一般廠商提供的血清為無菌,，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)澳洲牛血清有懸浮物,，例如澳洲北美胎牛血清中發(fā)現(xiàn)有懸浮物,，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清,。
3,、瓶裝胎牛血清(澳洲)南美解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫，待全部溶解后再分裝,，一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml,。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一,，減少沈淀的發(fā)生,。.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,。
4,、熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須,，一般不建議作此熱處理,，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有：細胞毒作用,，平滑肌細胞收縮,，肥大細胞和血小板釋放組，增強吞噬作用,，促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化,。
5、血清中的沉淀物和絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,，5分鐘去除，也可不用處理,。顯微鏡下"小黑點"：經(jīng)過熱處理過的血清,，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",，常誤認為血清受污染,。一般情況下，此小黑點不會影響細胞生長,，但如果懷疑血清質(zhì)量,，則應(yīng)立即停止使用，更換另一批號的血清,。
