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關于凱氏定氮儀的知識你掌握多少
閱讀：620 發(fā)布時間：2020-12-31
凱氏定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理，通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質(zhì)含量的儀器。因其蛋白質(zhì)含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法，故被稱為凱氏定氮儀，又名定氮儀、蛋白質(zhì)測定儀、粗蛋白測定儀,。
將有機化合物與硫酸共熱使其中的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。在這一步中,，經(jīng)常會向混合物中加入硫酸鉀來提高中間產(chǎn)物的沸點,。樣本的分析過程的終點很好判斷，因為這時混合物會變得無色且透明（開始時很暗）,，在得到的溶液中加入少量氫氧化鈉,，然后蒸餾。這一步會將銨鹽轉(zhuǎn)化成氨,。而總氨量（由樣本的含氮量直接決定）會由反滴定法確定：冷凝管的末端會浸在硼酸溶液中,。氨會和酸反應，而過量的酸則會在甲基橙的指示下用碳酸鈉滴定,。滴定所得的結(jié)果乘以特定的轉(zhuǎn)換因子就可以得到結(jié)果,。
凱氏定氮法的普遍適用性、準確性和可重復性已經(jīng)得到了的廣泛認可,。它已經(jīng)被確定為檢測食品中蛋白質(zhì)含量的標準方法,。但是，這種方法并不能給出真實的蛋白質(zhì)含量,，因為所測定的氮可能不僅僅是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化來的,。這可以從2007年美國寵物食品污染事件和2008年中國毒奶粉事件等食品安全事件中被體現(xiàn)：三聚氰胺，一種含氮量較高的物質(zhì),，被添加到了食品中以偽造較高的含氮量,。另外，由于不同的氨基酸序列,，這種方法也需要許多不同的校正因子。而且,，凱氏定氮法還需要使用濃硫酸和較長時間的加熱（一般來講,，大于1小時）。這也造成了在粗略測量蛋白質(zhì)含量時，杜馬斯法有時更方便些,。