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美國(guó)Biozellen-鼠尾膠原蛋白Ⅰ型溶液(2025全新升級(jí))
產(chǎn)品概述:
Biozellen®鼠尾膠原蛋白Ⅰ型溶液
貨號(hào) B-P-00001
規(guī)格 10mg,、20mg 、50mg,、100mg
保存條件 4℃,、2年
產(chǎn)品明細(xì)
Characterization | Biozellen® 鼠尾膠原蛋白Ⅰ型液 |
來(lái)源 | Rat Tail Tendon |
劑型 | Solution (0.01N HCl) |
酸堿值 | 2.0-3.0 |
規(guī)格 | 10mg、20mg,、50mg,、100 mg |
膠原蛋白濃度 | 3.0 - 4.5 mg/mL |
內(nèi)毒素 (EU/mL) | ≤ 1.0 |
無(wú)菌 (USP) | No growth |
儲(chǔ)存溫度 | 2 to 10 ℃ / 35.6 to 50 ℉ |
純 度 / SDS PAGE / electrophoresis / silver stain | ≧ 95% |
電泳圖譜分析 / SDS PAGE / Silver stain | ≧ 90% collagen containing within α, βandγbands ≦ 10% collagen containing with band traveling faster thanα |
細(xì)胞貼附測(cè)試 | Pass |
應(yīng)用
Biozellen® Collagen I 是二維環(huán)境中表面薄涂層的理想選擇; 它促進(jìn)各種細(xì)胞類(lèi)型的細(xì)胞粘附,,例如肝細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié),、肌肉細(xì)胞,、雪旺氏細(xì)胞、上皮細(xì)胞,; 涂層膠原蛋白 I 可用于研究腫瘤細(xì)胞的侵襲,、遷移和巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞的趨化性,。
膠原 I 3D 凝膠類(lèi)似于動(dòng)物細(xì)胞外基質(zhì) 在 3D 體外配置中的培養(yǎng),,與2D培養(yǎng)不同的是3D培養(yǎng)可以提供仿生物微環(huán)境可以操縱凝膠強(qiáng)度來(lái)影響 3D 培養(yǎng)中的細(xì)胞遷移;允許您研究 ECM 的變化對(duì)細(xì)胞發(fā)育,、趨化性,、遷移和形態(tài)的影響,。
注意
膠原蛋白產(chǎn)品在操作與制備過(guò)程中,需保持無(wú)菌環(huán)境,。
建議膠原蛋白與其他配制溶液要預(yù)行預(yù)冷,,操作過(guò)程中在冰上進(jìn)行制備。
涂覆程序
注意:使用這些建議作為指導(dǎo),,以確定您的培養(yǎng)系統(tǒng)的佳包被條件,。
1. 如果需要,將所需體積的膠原蛋白溶液從瓶子中轉(zhuǎn)移到稀釋容器中,。 使用無(wú)菌 0.01 N HCl 溶液進(jìn)一步稀釋至所需濃度,。
2.溫和搖動(dòng)膠原混合物直至材料wan全混勻。
3.將稀釋的膠原材料添加到培養(yǎng)表面,,確保整個(gè)表面都被覆蓋,。 (建議:5 μg/cm2)
4.室溫孵育,蓋上蓋子,,1小時(shí),。
5. 孵育后,吸出所有剩余材料,,直至表面干燥,。
6.用無(wú)菌培養(yǎng)基或1X PBS仔細(xì)沖洗涂層表面,避免刮傷表面,。
7.涂層表面準(zhǔn)備好即可使用,; 可以在 2-8°C無(wú)菌條件下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一周。
一般的 3-D 凝膠制備程序
注意:I 型膠原蛋白凝膠的特性取決于制備過(guò)程中的多種因素,,例如溫度,、pH 值和膠原蛋白濃度。
1. 將無(wú)菌 10X PBS,、無(wú)菌 1N NaOH,、無(wú)菌 dH2O、Biozellen® Collagen I 和無(wú)菌試管置于冰上,。
2.確定終體積和終膠原蛋白濃度,。 (建議濃度:0.5 - 3mg/ml)
3.計(jì)算如下:
4.執(zhí)行以下步驟:
(a) 在試管中加入 10X PBS。
(b) 在 10X PBS 中加入 1N NaOH 調(diào)節(jié) pH 值,。
(c) 將 dH2O 添加到 10X PBS/1N NaOH 中以匹配終體積,,混合復(fù)合物并置于冰中。
(d) 將 Biozellen®Collagen I 加入試管中,,混合無(wú)氣泡并置于冰上直至準(zhǔn)備使用,。
5.凝膠,將溶液無(wú)菌轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中,,放入37℃培養(yǎng)箱30 分鐘,。
含有培養(yǎng)基的 3-D 凝膠制備程序
對(duì)于使用培養(yǎng)基的 3D 凝膠系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),,建議使用以下方案。
1. 將無(wú)菌 10X 培養(yǎng)基,、無(wú)菌 1N NaOH,、Biozellen® Collagen I、無(wú)菌 1X 培養(yǎng)基(含或不含細(xì)胞)和無(wú)菌試管置于冰上,。
2. 選擇性添加,,如果10X 培養(yǎng)基中的成分不包含 NaHCO3, 則應(yīng)另外添加無(wú)菌的 NaHCO3 緩沖液(依據(jù) 10X 培養(yǎng)基操作步驟),,并放在冰上,。
3.確定終體積和終膠原蛋白濃度。 (建議濃度:0.5 - 3mg/ml)
4. 確定 3D 凝膠中的終細(xì)胞濃度,。 (建議:105 ~ 107 個(gè)細(xì)胞/毫升)
5.使用以下公式計(jì)算內(nèi)容物的體積,。
6.執(zhí)行以下步驟:
(a) 將 10X 培養(yǎng)基加入管中,。
(b) 在同一管中加入 1N NaOH,。
(c) 如果不含 NaHCO3,則添加額外的緩沖液,。
(d) 將計(jì)算過(guò)體積的Biozellen® Collagen I膠原蛋白加入試管中充分混合,,不 要產(chǎn)生氣泡,并將其放在冰上直至準(zhǔn)備使用,。 (注意: 請(qǐng)盡快使用含有膠原蛋白的混合物,,因?yàn)閺?span> 5 分鐘左右部分凝膠開(kāi)始凝固。)
(e)將含有懸浮細(xì)胞的 1x 培養(yǎng)基添加至裝有上述溶液的試管中,,并置于冰上,。
7.為了膠盡快凝固,請(qǐng)將裝有上述溶液的試管轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱,,并在 37℃, 5% CO2 的培養(yǎng)箱中放置 30 分鐘,。
計(jì)算公式:
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