CCK-8法檢測不同濃度化合物對細胞增殖活性影響

實驗儀器與試劑

表格一：實驗儀器

表格二：試劑

一、         實驗步驟

1、細胞消化,、計數(shù),、配制成濃度為5×10⁴個/mL 的細胞懸液,，96孔細胞培養(yǎng)板中每孔加入100μL 細胞懸液（每孔5×10³個細胞）,；

2、  將細胞培養(yǎng)板置于37℃,，5%CO₂ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜,；

3、  使用*培養(yǎng)液（90%培養(yǎng)液+10%胎牛血清）分別配置含不同濃度化合物的工作液,，混合均勻,；

4、  每孔加入100μL相應(yīng)工作液,，每種濃度設(shè)置3重復(fù),；

5,、  細胞在37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后棄上清液,，新鮮培養(yǎng)液洗滌每孔細胞1次,；

6、  將96孔板進行CCK-8染色,，λ=450nm,，測定OD值：

1)     每孔加入100μL CCK-8工作液（V_{培養(yǎng)液}： V _CCK-8原液 =10：1），在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)2小時,；

2)     λ=450nm,，酶標儀讀出每孔的OD 值，計算細胞增值率,。

7,、  計算各組細胞增值率