Femto-Sensitive ECL Solution是一種基于Luminol的高靈敏性,、非放射性化學發(fā)光底物,，用于檢測免疫印跡中固定在膜上的辣根過氧化物酶（HRP），可檢測飛克級別的抗原。持續(xù)發(fā)光時間長達6個小時,，可反復曝光于X射線膠片或化學發(fā)光成像系統(tǒng),，以獲得最佳的結果或剝離的免疫檢測試劑和再探測。

 Femto-Sensitive ECL Solution可用于Western Blot,，Northern Blot, Southern Blot, Dot Blot等實驗中檢測HRP標記的探針或者抗體,。

Preparation使用說明：

1. 常規(guī)電泳、轉膜,、HRP標記抗體或核酸探針孵育,、洗膜。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法,。核酸雜交膜用HRP標記探針雜交,，洗膜。

2. 洗滌膜上的 HRP 標記二抗時,，新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液Luminol/Enhancer solution 和 Stable Peroxide Buffer 1:1混合,，放置使之升到室溫否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液,，室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低,。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥,。將膜*浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm膜)充分接觸,。室溫孵育 3-5分鐘，準備立即壓片曝光,。孵育時間過長不會增加靈敏度,，有時還會導致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質是酶促反應,，使用過少的發(fā)光工作液不利反應進行,，也會導致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。為達節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量,。

4. 用鑷子夾起膜,，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。

5. 在 X 光膠片暗盒內面鋪一張面積大于膜的保鮮膜,。將雜交膜貼在保鮮膜上,，將保鮮膜折起來*包裹雜交膜，去除氣泡和皺褶,，可剪去邊緣部多余的保鮮膜,。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內,，最好蛋白帶面向上,。

6. 在黑暗中放入X光膠片,，分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘顯影沖洗。