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CHL 中國倉鼠肺細胞介紹

該細胞廣泛應用于染色體異常測試,。
細胞特性
1） 來源：中國倉鼠肺
2） 形態(tài)：成纖維細胞樣,，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,；

（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

（3）收到細胞后請拍照,，3天內如果發(fā)現污染，請及時拍照與我們聯系,。

細胞用途：僅供科研使用,。     

細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們,。

2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度,?？醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照,，（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據。

3） 觀察好細胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。

4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發(fā)現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）,。

5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基）,。

6）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后di一次傳代建議1：2傳代 ,。

CHL 中國倉鼠肺細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備DMEM（推薦iCell-0001）培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清，10%,；雙抗1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現用現配,。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至6ml。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

注：di一次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。

下面T25瓶為類；

1,，細胞凍存時,，取上清，可使用血球計數板計數,。

2,，4min ，1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細胞,，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%,，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液,，注意凍存管做好標識,。

3，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和技術服務：

一,、原代細胞服務
       各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
       多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源,；
       原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit、培養(yǎng)基添加劑等,；
       原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務；

二,、細胞株/系服務
       細胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關說明書,；
       細胞系培養(yǎng)過程的技術指導,；
       細胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關生長因子,、試劑等；

三,、iPS細胞
       iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）,；
       iPS細胞增殖及冷凍保存,；
       iPS基礎培養(yǎng)技術實習；
       新藥及實驗儀器上市前評估,；

四,、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗,、顯微鏡拍照服務等

五,、其他：根據客戶需要定制服務等