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RAMOS 人B淋巴細胞瘤細胞/STR鑒定介紹

該細胞來源于一位3歲的白人Burkitt淋巴瘤患者,；EBV陰性；表達IL-4受體和低親和性IgE受體（CD23）,；分泌IgM（lamda L）,；表達膜型和分泌型的免疫球蛋白。

細胞特性

1） 來源：血液

2） 形態(tài)：淋巴母細胞樣,，懸浮生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體,、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸,，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,；

（2）存活細胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長,，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

（3）收到細胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系,。

細胞用途：僅供科研使用,。

細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。

3） 將T25瓶中的細胞培養(yǎng)基離心后，去上清,，添加6ml*培養(yǎng)基,，加入新的T25瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4） 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.

5） 接到細胞次日,，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。

RAMOS 人B淋巴細胞瘤細胞/STR鑒定培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清（熱滅活），10%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

注：di一次傳代推薦傳代比例為1:2,，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。

下面T25瓶為類,；

1，細胞凍存時,，取上清,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2,，4min ,，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml,，每支凍存管凍存1ml細胞懸液,，注意凍存管做好標識。

3,，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

鏡像綺點（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：

一、原代細胞服務(wù)
       各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源,；
       多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源,；
       原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等,；
       原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù)；

二,、細胞株/系服務(wù)
       細胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關(guān)說明書,；
       細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導,；
       細胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等；

三,、iPS細胞
       iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）,；
       iPS細胞增殖及冷凍保存；
       iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習,；
       新藥及實驗儀器上市前評估,；

四、技術(shù)外包服務(wù)：各類細胞生物學實驗,、分子生物學實驗,、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等