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MT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞/STR鑒定特性

1） 來源：白血病

2） 形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣，圓形,，懸浮生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,；

（2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

（3）收到細(xì)胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系。

細(xì)胞用途：僅供科研使用,。

MT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞/STR鑒定接收后的處理：

1） 收到細(xì)胞后,，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行,，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,，同時給剛收到的細(xì)胞拍照，（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。

3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

4） 貼壁細(xì)胞：在運輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團生長,，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）,。

5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基）。

6）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后di一次傳代建議1：2傳代 ,。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640（推薦iCell-0002）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；β－巰基乙醇,，0.05mM,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至6ml,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 將細(xì)胞懸液按1：2到1:5比例分到新皿中或者瓶中,，補加培養(yǎng)基至6ml，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為例,；

1,，細(xì)胞凍存時，取上清,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。

2，4min ,，1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞凍存數(shù)量加入血清和DMSO,，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%,，細(xì)胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識,。

3，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

鏡像綺點（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：

一,、原代細(xì)胞服務(wù)
      各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源；
      多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源,；
      原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等；
      原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù),；

二,、細(xì)胞株/系服務(wù)
      細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關(guān)說明書,；
      細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)；
      細(xì)胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等；

三,、iPS細(xì)胞
      iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）,；
      iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存,；
      iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí),；
      新藥及實驗儀器上市前評估,；

四,、技術(shù)外包服務(wù)：各類細(xì)胞生物學(xué)實驗、分子生物學(xué)實驗,、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等