目錄:鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分類>>細(xì)胞系>> CFSC-8BCFSC-8B 大鼠肝星形細(xì)胞/鏡像綺點(diǎn)(iCell)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1*10^6 |
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貨號 | CFSC-8B | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 科研使用 |
CFSC-8B 大鼠肝星形細(xì)胞/鏡像綺點(diǎn)(iCell)介紹
該細(xì)胞于原代末期凍存,。
細(xì)胞特性
1) 來源:大鼠肝臟
2) 形態(tài):貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:
(1)干冰運(yùn)輸,,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,;
(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。
(3)收到細(xì)胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系,。
CFSC-8B 大鼠肝星形細(xì)胞/鏡像綺點(diǎn)(iCell)用途:僅供科研使用,。
細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基,;北美胎牛血清,,10%;雙抗1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 收到細(xì)胞后*傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行,。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。
下面T25瓶為例,;
1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一,、原代細(xì)胞服務(wù):
各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑,、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)
二,、細(xì)胞系服務(wù):
細(xì)胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關(guān)說明書
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)
細(xì)胞系培養(yǎng)基,、添加劑、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等
三,、iPS細(xì)胞服務(wù):
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實(shí)習(xí)
新藥及實(shí)驗(yàn)儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù),、客戶定制服務(wù)等
鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司
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