目錄:鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司>>細胞分類>>細胞系>> J774A.1J774A.1 小鼠單核巨噬細胞/鏡像綺點（iCell）
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1*10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | J774A.1 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 科研使用 |
J774A.1 小鼠單核巨噬細胞/鏡像綺點（iCell）介紹
該細胞來源于BABL/cN小鼠，有抗體依賴的吞噬作用,，生長受硫酸葡聚糖,、PPD和LPS的抑制,；可產(chǎn)生IL-1β和大量的溶菌酶,。
細胞特性
1） 來源：BABL/cN小鼠淋巴
2） 形態(tài)：單核細胞/巨噬細胞樣
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇,；
（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系,。
J774A.1 小鼠單核巨噬細胞/鏡像綺點（iCell）用途：僅供科研使用,。
細胞接受后的處理：
1） 收到細胞后,，請檢查是否漏液,，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們,。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，添加6ml新的培養(yǎng)基。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代,。
5） 接到細胞次日,，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備DMEM培養(yǎng)基,；北美胎牛血清，10%,；雙抗，1%,。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
如果有細胞刮子,，可按以下方法操作：
Protocol: Subcultures are prepared by scraping.
For a 25 cm2 flask, remove all but 5 ml of the culture medium. (adjust volume accordingly for different culture vessels) Dislodge cells from the flask substrate with a cell scraper, aspirate and dispense into new flasks.
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹：
一,、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務：
細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等
三,、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術外包服務,、客戶定制服務等
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