目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司>>細胞分類>>細胞系>> HC11HC11 小鼠乳腺上皮細胞/鏡像綺點(iCell)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1*10^6 |
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貨號 | HC11 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 科研使用 |
HC11細胞株是COMMA-1D細胞的催乳素反應型克隆,。它不需要加入復雜的外加的細胞外基質(zhì)或與其他細胞類型的共培養(yǎng),,就能在培養(yǎng)中分化。HC11細胞產(chǎn)生自己的細胞外基質(zhì)蛋白,,如層粘連蛋白,,該細胞對泌乳激素(催乳素、胰島素和地塞米松)響應并生產(chǎn)牛乳蛋白如β-酪蛋白,。
細胞特性
1) 來源:小鼠,;乳腺
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼璧生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇,;
(2)存活細胞,,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,,再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用,。
HC11 小鼠乳腺上皮細胞/鏡像綺點(iCell)接收后的處理:
1) 收到細胞后,,請檢查是否漏液,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備1640培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,;雙抗,,1%;谷氨酰胺,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例,;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹:
一,、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二,、細胞系服務:
細胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三,、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術外包服務、客戶定制服務等
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