目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司>>細胞分類>>細胞系>> 3D4/21細胞3D4/21 豬肺泡巨噬細胞/鏡像綺點(iCell)
純度 | 99% | 供貨周期 | 一周 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 1*10^6 | 貨號 | 3D4/21 |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥,綜合 | 主要用途 | 科研使用 |
母細胞3D4來源于pSV3neo質粒轉染豬原代肺泡巨噬細胞得到的,。該克隆通過G418篩選得到。
細胞特性
1) 來源:豬肺
2) 形態(tài):巨噬細胞樣,,貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 個/mL
4) 污染:支原體,、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇
(2)存活細胞,,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,,再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,,3天內如果發(fā)現污染,,請及時拍照與我們聯系。
細胞接受后的處理
1) 收到細胞后,,請檢查是否漏液,,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的培養(yǎng)基,。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系,。
細胞用途
僅供科研使用,。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,;胎牛血清,,10%,;丙酮酸鈉 ,1mM,;NEAA,,0.1mM;Hepes,,10mM,;L-GLU,2mM,;葡萄糖,,2.2g/l;雙抗,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現用現配,。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕吹打后吸出,,移入15ml離心管中,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務:
細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關生長因子,、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務,、客戶定制服務等
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司