目錄:鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分類>>細(xì)胞系>> UMNSAH/DF-1細(xì)胞UMNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞/鏡像綺點
純度 | 99% | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1*10^6 | 貨號 | UMNSAH/DF-1 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 | 主要用途 | 科研使用 |
UMNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞/鏡像綺點(iCell)介紹
該細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株,,自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng),;傳代直到衰老,;在衰老過程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿;不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次,。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖,,說明這些細(xì)胞是永生化而沒有轉(zhuǎn)化。該細(xì)胞可作為病毒增殖,、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì),。
細(xì)胞特性
1) 來源:雞胚
2) 形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:
(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,;
(2)存活細(xì)胞,,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細(xì)胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細(xì)胞用途:僅供科研使用,。
UMNSAH/DF-1 雞胚胎成纖維細(xì)胞/鏡像綺點(iCell)接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,,請檢查是否漏液,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于39℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿90%請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,。
5) 接到細(xì)胞次日,,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,;雙抗 1%
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:39℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1,復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml,。
2,,細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于39℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化,。
3. 輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注:*次傳代推薦傳代比例為1:2,,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。
下面T25瓶為類,;
1,,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗一遍后加入1mlyi酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,,4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,,輕輕混勻,,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,,將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
備注:細(xì)胞凍存后復(fù)蘇存活率只有50%左右,建議加大凍存密度,。
鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一,、原代細(xì)胞服務(wù):
各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實驗外包服務(wù)
二,、細(xì)胞系服務(wù):
細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關(guān)說明書
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)
細(xì)胞系培養(yǎng)基,、添加劑、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等
三,、iPS細(xì)胞服務(wù):
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí)
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù),、客戶定制服務(wù)等
鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司
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