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WPMY-1 人正常前列腺基質永生化細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）介紹

通過一個pRSTV質料結構，用SV40大T抗原對基質細胞進行永生化,。肌成纖維基質細胞株,， WPMY-1與RWPE-1細胞一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質細胞,。

WPMY-1 人正常前列腺基質永生化細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）特性

1） 來源：前列腺

2） 形態(tài)：成肌細胞,，貼壁生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸,，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長,，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

（3）收到細胞后請拍照,，3天內如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系,。

細胞用途：僅供科研使用,。

細胞接受后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。

3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的*培養(yǎng)基,。

4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。

5） 接到細胞次日,，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系,。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清，10%,；雙抗,，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行,。

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。

鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和技術服務：

一,、原代細胞服務
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源,；
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
      原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等；
      原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務,；

二,、細胞株/系服務
      細胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關說明書,；
      細胞系培養(yǎng)過程的技術指導；
      細胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等；

三,、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）,；
      iPS細胞增殖及冷凍保存；
      iPS基礎培養(yǎng)技術實習,；
      新藥及實驗儀器上市前評估,；

四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗,、分子生物學實驗,、顯微鏡拍照服務等

五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務等