目錄:鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分類>>細(xì)胞系>> 786-O細(xì)胞786-O 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞/STR鑒定
純度 | 90% | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1*10^6 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研用途 |
786-O 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹
此細(xì)胞源自一個原發(fā)性透明細(xì)胞癌。此細(xì)胞有微絨毛和橋粒,,能在軟瓊脂是生長,。 此細(xì)胞生成的一個PTH樣的多肽與乳癌和肺癌中的肽相似。這個多肽的N端與PTH相似,,活性與PTH相似,,分子量為6000道爾頓。
786-O 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)特性
1) 來源:腎,;腎細(xì)胞腺癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:
(1)干冰運輸,,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細(xì)胞,,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。
(3)收到細(xì)胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系,。
細(xì)胞用途:僅供科研使用,。
細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,,請檢查細(xì)胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,;雙抗,,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 收到細(xì)胞后*傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行,。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面T25瓶為例,;
1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):
一、原代細(xì)胞服務(wù)
各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源,;
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源,;
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等,;
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù);
二,、細(xì)胞株/系服務(wù)
細(xì)胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關(guān)說明書,;
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo);
細(xì)胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關(guān)生長因子、試劑等,;
三,、iPS細(xì)胞
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存,;
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí),;
新藥及實驗儀器上市前評估;
四,、技術(shù)外包服務(wù):各類細(xì)胞生物學(xué)實驗,、分子生物學(xué)實驗、顯微鏡拍照服務(wù)等
五,、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)