目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司>>細胞分類>>細胞系>> 293A細胞HEK-293A 人胚腎細胞/STR鑒定
純度 | 90% | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1*10^6 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥,綜合 |
主要用途 | 科研用途 |
HEK-293A 人胚腎細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹
該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主,??杀磉_異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成,。
細胞特性
1) 來源:胚腎細胞
2) 形態(tài):上皮細胞樣,,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,,收到后應繼續(xù)生長,,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。
(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,,請及時拍照與我們聯(lián)系,。
細胞用途:僅供科研使用。
HEK-293A 人胚腎細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)接受后的處理:
1) 收到細胞后,,請檢查是否漏液,,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系,。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM培養(yǎng)基,;優(yōu)質胎牛血清,10%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行,。
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為例,;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,,細胞變圓脫落后,,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數,。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和技術服務:
一,、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源,;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等;
原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務,;
二,、細胞株/系服務
細胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關說明書,;
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導;
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等,;
三,、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
iPS細胞增殖及冷凍保存,;
iPS基礎培養(yǎng)技術實習,;
新藥及實驗儀器上市前評估;
四,、技術外包服務:各類細胞生物學實驗,、分子生物學實驗,、顯微鏡拍照服務等
五、其他:根據客戶需要定制服務等