目錄:鏡像綺點（上海）細胞技術(shù)有限公司>>細胞分類>>細胞系>> Bel-7405細胞Bel-7405 人肝癌細胞/STR鑒定
| 純度 | 90% | 供貨周期 | 一周 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1*10^6 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研用途 |
Bel-7405 人肝癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）特性
1） 來源：肝癌
2） 形態(tài)：上皮細胞樣,，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,；
（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途：僅供科研使用,。
Bel-7405 人肝癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）接受后的處理：
1） 收到細胞后,，請檢查是否漏液，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們,。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代,。
5） 接到細胞次日,，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基；北美胎牛血清,，10%,；雙抗1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行,。
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶，細胞變圓脫落后,，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。
3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務：
一,、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源,；
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等；
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務和整體實驗外包服務,；
二,、細胞株/系服務
細胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關(guān)說明書,；
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導；
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關(guān)生長因子、試劑等,；
三,、iPS細胞
iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）；
iPS細胞增殖及冷凍保存,；
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習,；
新藥及實驗儀器上市前評估,；
四、技術(shù)外包服務：各類細胞生物學實驗,、分子生物學實驗,、顯微鏡拍照服務等
五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務等
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