目錄:鏡像綺點(diǎn)（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司>>細(xì)胞分類>>細(xì)胞系>> Bel-7402細(xì)胞Bel-7402 人肝癌細(xì)胞/STR鑒定
| 純度 | 90% | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1*10^6 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研用途 |
Bel-7402 人肝癌細(xì)胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）介紹
BEL-7402細(xì)胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。 細(xì)胞群體倍增時間為20小時,。移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié),。細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣細(xì)胞。在電子顯微鏡下亦顯示上皮細(xì)胞所具有的橋粒和張力原纖維,，與臨床肝癌細(xì)胞相似,。分瓶培養(yǎng)第四天時，其有絲分裂指數(shù)約為7%,。 BEL-7402細(xì)胞的染色體數(shù)為不足三倍體,，有一個異常的近端著絲點(diǎn)染色體。間接免疫熒光法測BEL-7402細(xì)胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng),。LDH同工酶譜顯示與成年人肝細(xì)胞不同,，而與人胚肝及臨床肝癌相近。
細(xì)胞特性
1） 來源：肝癌
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣,，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：
（1）干冰運(yùn)輸,，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,；
（2）存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長,，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。
（3）收到細(xì)胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系,。
細(xì)胞用途：僅供科研使用,。
Bel-7402 人肝癌細(xì)胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）接受后的處理：
1） 收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4） 如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,。
5） 接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備McCOY's 5A培養(yǎng)基；北美胎牛血清,，10%,；雙抗，1%,。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細(xì)胞后*傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，建議凍存一支備用,，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。
下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。
3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(diǎn)（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：
一、原代細(xì)胞服務(wù)
各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源,；
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源,；
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等,；
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)；
二,、細(xì)胞株/系服務(wù)
細(xì)胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關(guān)說明書,；
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo),；
細(xì)胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等,；
三、iPS細(xì)胞
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）,；
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存,；
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實(shí)習(xí)；
新藥及實(shí)驗(yàn)儀器上市前評估,；
四,、技術(shù)外包服務(wù)：各類細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),、顯微鏡拍照服務(wù)等
五,、其他：根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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