目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司>>細胞分類>>細胞系>> Calu-3細胞Calu-3人肺腺癌細胞/STR鑒定
純度 | 99% | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1*10^6 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 |
主要用途 | 科研用途 |
Calu-3人肺腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)
介紹
該患者為25歲白人男性,,已經(jīng)用環(huán)lin酰胺,、爭光mei素、阿mei素進行過治療,。
細胞特性
1) 來源:肺
2) 形態(tài):上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體,、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇,;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。
(3)收到細胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系,。
細胞用途:僅供科研使用,。
Calu-3人肺腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)
接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為類;
1,,細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1mlyi酶,,細胞變圓脫落后,,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2,,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,,細胞密度不低于1x10E6/ml,,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識,。
3,,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹:
一,、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術(shù)服務及整體實驗外包服務
二,、細胞系服務:
細胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等
三,、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術(shù)實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術(shù)外包服務,、客戶定制服務等
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