人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y是一種常用的神經(jīng)元樣細(xì)胞系,,廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)和藥理學(xué)研究中,。這些細(xì)胞來源于兒茶酚能神經(jīng)系統(tǒng)中的腫瘤組織,并具有類似原代人類交感神經(jīng)節(jié)或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)前列腺素E受體表達(dá)的功能,。
包括兩種類型的細(xì)胞,,主要的是小的神經(jīng)母細(xì)胞樣的細(xì)胞,另一種是大的透明成纖維細(xì)胞,。細(xì)胞提交到ATCC時(shí)已經(jīng)傳到第36代,。已經(jīng)證明細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)到80代以上。
細(xì)胞中的黑點(diǎn),,是經(jīng)常有的事情,,并不是細(xì)胞不夠好,也不是滅菌技術(shù)部過關(guān),,有些是細(xì)胞本身帶的,,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,,還有就是血清和培養(yǎng)基,,主要分以下幾種情況:
1、如果人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y小黑點(diǎn)有增殖趨勢,,則有可能是細(xì)菌,、真菌或支原體污染,需要處理,。
2,、如果小黑點(diǎn)沒有增殖趨勢,且不影響細(xì)胞生長,,也不影響實(shí)驗(yàn)的話,,則可能有以下情況:
(1)是“黑膠蟲”,,
?。?)是核糖體,也可能是雜質(zhì)3)是細(xì)胞碎片,,或血清中的里德沉淀析出,,在做布朗運(yùn)動。
處理人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y細(xì)胞黑點(diǎn)的一些好的意見:
換好一點(diǎn)的血清,;如果是貼壁細(xì)胞的話,,可用無菌的PBS洗幾次,,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,,就不太好處理,,可以向其中少加一點(diǎn)滋養(yǎng)細(xì)胞(從小鼠腹腔內(nèi)取的巨噬細(xì)胞,這種細(xì)胞不分裂,,過一陣就死掉了,,)。
加滋養(yǎng)細(xì)胞對有黑膠蟲的剛復(fù)蘇的細(xì)胞很有效,!還有就是實(shí)驗(yàn)環(huán)境要注意好,,保持細(xì)胞間整個(gè)環(huán)境的潔凈度;
換用進(jìn)口的一次性塑料培養(yǎng)瓶,;建議清理無菌室所有物品,,在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液,,堅(jiān)持天天洗,,傳代時(shí)加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,,一段時(shí)間后,,蟲子就會大大減少,對細(xì)胞的生長也不會有大的影響,;有材料具有一定的作用,,可以和換液結(jié)合起來使用。
SH-SY5Y 細(xì)胞在以下領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用:
1,、神經(jīng)退行性疾病:對與Alzheimer's和Parkinson's等重要的老年性的反應(yīng)模型進(jìn)行基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)方面 大量使用該類型 的類型
2,、藥物篩選:SH-SY5Y細(xì)胞性質(zhì)適合評估許多化合物對CNS運(yùn)動,、認(rèn)知及情感相關(guān)處理之影響。因此,,它們被視為開發(fā)抑郁和焦慮治療方法等新藥物的關(guān)鍵工具,。
3、分子生物學(xué)以及遺傳學(xué):作為易于操縱并進(jìn)行基因編輯(CRISPR/Cas9) 的均衡器,,SH-SY5Y及其改進(jìn)品種可幫助我們設(shè)計(jì)解決特定催化劑機(jī)制問題所需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件,。
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