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血清質(zhì)檢方法和重要作用

閱讀:1721      發(fā)布時(shí)間:2017-10-9
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細(xì)胞培養(yǎng)基的構(gòu)成中動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長繁殖起著重要作用,。在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用又是zui廣泛的,所以想要細(xì)胞在培養(yǎng)過程中長的好,、穩(wěn)定,,牛血清的質(zhì)量好壞直接影響生物研究的質(zhì)量和安全性,使用質(zhì)量好的牛血清也是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié),。

       血清是提供生長激素,、營養(yǎng)物,,以及低分子營養(yǎng)物;提供結(jié)合蛋白,;能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,;是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源,;起酸堿度緩沖液作用,;提供蛋白酶抑制劑;細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,,保護(hù)細(xì)胞不受損傷,;能與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用,。

 

 

      血清分類
      胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血
      新生牛血清:出生12-24小時(shí)新生牛靜脈采血
      小牛血清:出生三月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清
      血清來源
      來自國內(nèi)非疫區(qū),,有說明血清來源的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況,。
      血清收集
      胎牛血清是心臟穿刺取血,,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血。血清在低溫下采集,、一次分離,、分離后立即混合凍存,符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn),。
      血清制備
      1,、熱滅活血清(非必須)
      2、γ-射線照射:γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒,、支原體,。
      3、除菌過濾:胎牛血清要通過三層100nm過濾,。
      血清質(zhì)檢方法
      ⑴,、化學(xué)檢測
      A 生化檢測:膽固醇,、甘油三酯,、膽紅素 、尿素,、尿酸,、葡萄糖、谷丙轉(zhuǎn)氨酶,、高筒,、體  酮、雌二醇等檢測
      B 微量元素檢測:鉀,、鈉,,鐵,、氯化物、鈣,、鎂,、總鐵結(jié)合力、血清唾液酸等檢測
      C 蛋白檢測:白蛋白和球蛋白檢測
      ⑵,、微生物檢查
      ①,、細(xì)菌和真菌:直接培養(yǎng)法
      ②、支原體檢測:培養(yǎng)法,,DNA熒光染色
      ③,、病毒檢測:直接熒光抗體檢測
      牛蘭舌病毒 Bovin blue tongue;
      牛腺病毒 Bovine Adenovirus,;
      牛細(xì)小病毒 Bovine Parvovirus,;
      牛病毒性腹泄病毒 Bovine Viral Diarhea Virus;
      狂犬病病毒 Rabies,;
      呼腸弧病毒 Reovirus,;
      牛呼吸道合胞病毒 BRSV;

      副流感病毒Ⅲ型 Parainfluenza,。

      工欲善其事必先利其器,,所以選擇好的血清也相當(dāng)?shù)闹匾瑸榱烁玫呐囵B(yǎng)細(xì)胞,,一定要選擇正規(guī)質(zhì)量好的血清,,不要隨便使用便宜的,導(dǎo)致zui后的科研成果不理想,。

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