目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>培養(yǎng)基>>Abnbio培養(yǎng)基>> AB30042Abnbio 0.25胰酶溶液 100ml
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
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貨號 | AB30042 | 主要用途 | 細胞培養(yǎng) |
產(chǎn)品說明: 在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)以及傳代細胞培養(yǎng)中,,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液,。常用的消化液為,,EDTA等,,其功能主要是使細胞間的蛋白質(zhì)(如細胞外基質(zhì))水解,,使組織或貼壁細胞分散成單個細胞,,制成細胞懸液用于進一步的實驗,。 -EDTA消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%和0.02?TA(0.53mM),溶于無鈣鎂鹽溶液中,,經(jīng)過濾除菌,,可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。-EDTA消化液具有方便快速,、穩(wěn)定安全,、細胞狀態(tài)好等特點。通常室溫消化2分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞,。-EDTA消化液有含酚紅和不含酚紅2類產(chǎn)品,,酚紅具有pH 指示作用。
1. 貼壁細胞的消化: a) 吸去培養(yǎng)液,,用無菌的PBS,、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清,。b) 加入少量-EDTA消化液,,蓋過細胞即可,室溫放置1-2分鐘,。不同的細胞消化時間有所不同,,對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。 c) 顯微鏡下觀察,,細胞明顯收縮,,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的規(guī)格100ml 100ml 備注不含酚紅含酚紅 變化,;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液,。加入含血清的細胞培養(yǎng)液,,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗,。 d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,,可加入-EDTA消化液重新消化。 e) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,,直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來,。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,,盡量去除細胞消化液后,,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗,。 2. 組織的消化: 不同的組織需要消化的時間相差很大,,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1.由于組織或細胞性質(zhì)不同,,實驗人員應(yīng)依據(jù)具體情況,,確定最佳消化時間;消化細胞時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁和生長狀況,; 2.本產(chǎn)品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,,避免消化液被微生物污染,; 3.不宜4℃長期保存,切忌反復(fù)凍融,,小量使用時建議分裝凍存,; 4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。 |