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蛋白交互作用分析系統(tǒng)

品牌介紹：

ATTO株式會社成立于1964年，是日本zui大,、世界zui著名的電泳廠商之一，具有完整的常規(guī)電泳產(chǎn)品系列,。作為日本*的電泳品牌，ATTO一直秉承著“世界信賴的品質(zhì)”的精神,，其產(chǎn)品憑借的精致和可靠的性能，具有了超越其他品牌產(chǎn)品的實力,，成為小型電泳產(chǎn)品的。

ATTO株式會社同樣也是世界上zui早研制熒光發(fā)光儀器的廠家之一,。隨著人類更深層次的探索生命的奧秘，熒光檢測已成為一種非常有效的手段,。ATTO依托*的技術和強大的科研實力，連續(xù)開發(fā)出多款的熒光檢測儀器,，在應用上突破了傳統(tǒng)熒光儀器的局限性，把這項技術又提高到一個新的水平,，滿足更高要求的科研工作要求,。

蛋白交互作用分析系統(tǒng)

產(chǎn)品性能：

主要用于生物學領域的冷光和熒光檢測波長測定：如

FRET（熒光共振能量轉移）分子設計的調(diào)查

BRET（生物發(fā)光共振能量轉移）分子設計的調(diào)查

熒光/冷光試劑的發(fā)展和質(zhì)量控制

熒光/冷光反應的分析

用途特征;

1． 分光功能,；同時測定相同條件下的測量范圍內(nèi)不同波長的光

2． 一個冷CCD相機做為檢測器,，通過調(diào)節(jié)曝光時間即可增加檢測靈敏度

LumiFL-Spectro capture用一個高靈敏度的冷CCD做檢測器,，增加了靈敏度,，同時有利于整個波長范圍內(nèi)的同時測量。這個單元是由光分離部分和檢測裝置做為基本結構；同時,，如果客戶需要測量的樣品是靠熒光激發(fā)的，還能連接熒光激發(fā)光源進行測定（可選：請在要求中注明）,。熒光樣品的測定可以用石英材質(zhì)的容器,，冷光樣品可以用塑料的小離心管,。

硬件特征：

1,、電子的冷CCD相機做為檢測器

2、CCD可以同時接收和檢測整個目標波長范圍區(qū)的所有光

3,、CCD比光電倍增管PMT有更高的量子效率

4,、所有波長同時檢測,，大大縮短了檢測時間

5、測定波長范圍：400-800nm

6,、可以長時間曝光（提高了微小樣品的檢測靈敏度）

7、如果裝置熒光激發(fā)光源,，還可以測定FRET或熒光底物

與常規(guī)的分光計比較如下：

要捕獲弱光波長內(nèi)的全部變化,，必須要有測定小樣品的高靈敏度的檢測裝置。常規(guī)的光度計是在把光分散后采用光電倍增管（PMT）一個個的檢測,，這樣的話，敏感度大大降低,，同時可能會由于以下原因沒有達到一定光密度，導致樣品不能側定出光譜：

（1）PMT的定量效率本身就比CCD低

（2）測定時間短

更重要的是,，如果為補償?shù)挽`敏度的不便而將掃描時間延長,，冷光或熒光就會逐漸變細，反而得不償失,，得不到精確的光譜。

樣品測量：

發(fā)光樣品——濾光片元件組——細縫元件組——衍射光譜——所有波長的光通過冷CCD成批量檢測

1．樣品可以在石英杯或者PCR管內(nèi)測定；冷光樣品（細胞或蛋白）都可以測

2．聚光鏡/濾光片：可以設定單片激發(fā)光濾片

3．細縫元件組：可以聚集樣品光

4．衍射光柵：分離樣品光

5．檢測元件：整個樣品的光被分離后的光譜可經(jīng)冷CCD同時測定,；測量時間短，可以通過長時間曝光達到提高靈敏度的效果,。

舉例：

BRET樣品的測定：

當蟲熒光素加到藍色熒光素酶Vluc和黃色熒光蛋白YFP的融合蛋白上，熒光素和酶反應產(chǎn)生能量,。一部分能量轉移到YFP上,，BRET反應就開始了,。如果我們插入一小段包含目的序列（KR）的短肽片段，它可以轉運酶PC1到Vluc-PC1這個復合蛋白上,，識別并優(yōu)先結合YFP的肽鏈序列。用AB-1850測定這個融合物的光譜,，460nm下的Vluc冷光和527nm下的YFP都發(fā)出了強光,，這樣BRET反應被有力地證實了,。接下來，PC1加入反應體系,，527nm下的光減弱了,，峰值變小,。這個結果可以這樣解釋：PC1搶先結合到復合蛋白上，切斷了能量轉移到GFP上的通路,，所以BRET的效率降低,，通過檢測數(shù)量的降低可以檢測PC1的活性。

生物技術領域的用途：

BRET或FRET用途中的評估分子設計

為完成BRET或FRET的實驗，首先需要預實驗階段的檢驗分子設計,。這種情況下，用光學濾光片檢測冷光或熒光樣品不可能把樣品的全部發(fā)光波長都檢測到,，同時也不能過有效而充分地檢測到能量轉移期間波長的變化,。而如果用AB-1850,，這些就不成問題了，可以有效地進行分子設計,。

BRET或FRET：zui近這兩種技術成為熱門,，被廣泛應用于分析蛋白間,、蛋白和核酸間的,，或者對蛋白進行修飾、剪切和空間構象改變后的功能研究,。

FRET是一種現(xiàn)象,，從激發(fā)熒光的分子（供體）產(chǎn)生的光能量激活了其它熒光分子（受體），從而受體發(fā)光,。它一般發(fā)生在受體和供體間存在一定的距離和空間關系，通過測定發(fā)出的光的波長,，就可以判斷FRET是否發(fā)生,。

BRET 中,，熒光分子（供體）被冷光分子所取代，光也不是由供體發(fā)出,，而是受體被冷光分子的冷光激活,。BRET 中，如果冷光底物在測定時加入,，檢測就可以進行了，所以不需要高能量的激發(fā)光源裝置,。這樣就降低了對樣品的損傷,。

性能參數(shù)：

1.冷光、熒光測定裝置

2.光譜成像：

衍射光柵數(shù)目：1個（標準）光柵：150pc/mm

Braze 波長：500nm

3.測量樣品部分：

測定器皿：石英杯（4mm*4mm）/ 0.2ml PCR管/ 35mm 培養(yǎng)皿

樣品體積：10ul-100ul

瞬時冷光測定：注入孔（硅酮隔板）

激發(fā)光源的連接：FC接管（標配）

4.軟件：

功能：測量和光波數(shù)據(jù)分析

接口： USB2.0

5.體積和重量：

大?。?10mm（W）*725mm(D)*390mm（H）

重量：58kg            

電源：C100v  50/60Hz  290V

6.標準配件:

LumiFL-Spectro 光捕獲系統(tǒng)：1臺

35mm 平皿實驗組區(qū)：1PC

方形細胞樣品區(qū)：1PC

PCR管樣品區(qū)：1

熒光測量時的濾鏡托板：1

AC繩：1

USB接線：1

瞬時熒光測定時需要用到的試劑加樣接管：1

石英容器：1

PCR管：1袋

為瞬時測定提供的試劑加樣橡膠閥：1袋

數(shù)據(jù)分析軟件（CD版）：1