聚合酶鏈反應(yīng)分析儀,，核酸提取儀溫度校準(zhǔn)溫度準(zhǔn)確性是PCR儀重要的性能指標(biāo)，如溫度準(zhǔn)確性低可直接造成非特異性擴增,，甚至是錯誤的擴增結(jié)果,，造成假陽性和假陰性,。

市場上各家廠商考核基因擴增儀（PCR儀）性能的主要指標(biāo)，一般廠家的企業(yè)指標(biāo)為±0.5℃,，一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度準(zhǔn)確度為±0.3℃。故需對PCR儀控溫準(zhǔn)確度進行測試,。

校準(zhǔn)實驗平均溫度的計算公式為：I—參加檢測的溫度探頭序號；n—參加檢測的溫度探頭的數(shù)量

（二）,、溫場均勻性

由于PCR儀加熱器加熱不均勻,，導(dǎo)致PCR儀模塊上各孔存在一定溫差。造成試驗結(jié)果偏差,。一般PCR儀邊緣點的溫度低于中間區(qū)域,，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標(biāo)。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定均勻性為±0.5℃,，一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度均勻度為±0.3℃,。

校準(zhǔn)實驗時，

聚合酶鏈反應(yīng)分析儀,，核酸提取儀溫度校準(zhǔn)通過選取孔板中16個特殊反應(yīng)位置來測量溫度,，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個探頭在同一時刻max溫度與min 溫度的差值,。均勻度計算公式為：tmax-tmin

（三）,、升降溫速率

PCR擴增產(chǎn)物數(shù)量的多少決定了PCR的效率,。為了在短時間內(nèi)獲得盡可能多的產(chǎn)物,，需要儀器在升降溫段具有按照預(yù)設(shè)升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達15~20℃）,。一個完整的PCR過程,，是由若干個升溫→恒溫→降溫循環(huán)構(gòu)成的。因為“變性",，“退火"和“延伸"3個階段是必須要保證的,。因此,，只有使升降溫的過程盡可能地迅速，才能縮短每個PCR循環(huán)以及整個PCR 過程所需時間。一般廠家的企業(yè)指標(biāo)規(guī)定升溫速率為±3℃/sec,。

儀器校準(zhǔn)實驗時,，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時間,；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時間,。