安捷倫色譜柱的維護。
1,、建議使用保護柱,,防止顆粒進入柱內造成堵塞;
2,、建議選擇合適pH范圍的色譜柱,,避免填料溶劑老化;
3,、緩沖鹽的正確使用:
緩沖鹽使用不當會沉淀,,堵塞篩板和填料,,使填料變硬,增加柱壓,,阻礙基質上鍵合相的碳鏈自由伸展,,降低色譜柱的保留能力,降低柱效率并縮短其使用壽命,。緩沖鹽分離后很難去除,。因此,正確使用緩沖鹽對于延長色譜柱的使用壽命非常重要,。
安捷倫色譜柱使用前過渡,,使用后沖洗!
1)等度條件:用過渡流動相制備前后柱體積不少于20-30柱,,或制備后用過渡流動相以1.0ml/min(根據色譜柱規(guī)格調整)洗柱體積過夜;
2)梯度條件:制備前,,用與初始流動相相同的流動相組成,以工作流速洗滌色譜柱不少于20-30柱體積,;配制后用過渡流動相洗色譜柱不少于20-30柱體積,,梯度盡量平緩,避免緩沖鹽沉淀,;
3)過渡型流動相:有機相和水相的比例與分析流動相中兩相的比例一致,,或者水相的比例高于分析流動相,*沒有緩沖鹽,;
強保留物質在安捷倫色譜柱中的積累是一個緩慢的過程,,導致峰展寬和拖尾,柱效下降,,保留時間改變,,柱壓升高;很難判斷復雜樣品中是否存在強滯留物質,,因此必須杜絕所有這些方法,。每天分析完畢后,用純甲醇或乙腈反洗色譜柱20柱體積以上,。
安捷倫色譜柱清洗方法:
1)沒有使用緩沖鹽,。每天使用后,用純甲醇或純乙腈的柱體積在20以上,;
2)上述方法除去緩沖鹽后,,用純甲醇或純乙腈反洗柱子20柱體積以上;
3)處理方法:水→乙腈→異丙醇(或氯仿)→乙腈→水,,每步洗滌不少于30柱體積,。
注意:不要輕易打開柱頭,因為柱頭一旦打開,,就很難恢復到新柱的水平,。因柱頭開啟造成的檢測后果由客戶負責,。
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