1、樣品的來源和預(yù)處理方法
GC能直接分析的樣品通常是氣體或液體,，固體樣品在分析前應(yīng)當(dāng)溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，而且還要保證樣品中不含GC不能分析的組分(如無機(jī)鹽)，可能會損壞色譜柱的組分,。這樣,，我們在接到一個未知樣品時，就必須了解的來源,，從而估計樣品可能含有的組分,，以及樣品的沸點(diǎn)范圍,。如果樣品體系簡單，試樣組分可汽化則可直接分析,。如果樣品中有不能用GC直接分析的組分,，或樣品濃度太低，就必須進(jìn)行必要的預(yù)處理,，如采用吸附,、解析、萃取,、濃縮,、稀釋、提純,、衍生化等方法處理樣品,。
2、確定儀器配置
所謂儀器配置就是用于分析樣品的方法采用什么進(jìn)樣裝置,、什么載氣,、什么色譜柱以及什么檢測器。
一般應(yīng)首先確定檢測器類型,。碳?xì)浠衔锍＿x擇FID檢測器,，含電負(fù)性基團(tuán)(F、Cl等)較多且碳?xì)浜枯^少的物質(zhì)易選擇ECD檢測器;對檢測靈敏度要求不高,，或含有非碳?xì)浠衔锝M分時,，可選擇TCD檢測器;對于含硫、磷的樣品可選擇FPD檢測器,。
對于液體樣品可選擇隔膜墊進(jìn)樣方式,，氣體樣品可采用六通閥或吸附熱解析進(jìn)樣方法，一般色譜僅配置隔膜墊進(jìn)樣方式,，所以氣體樣品可采用吸附-溶劑解析-隔膜墊進(jìn)樣的方式進(jìn)行分析,。
根據(jù)待測組分性質(zhì)選擇適合的色譜柱，一般遵循相似相容規(guī)律,。分離非極性物質(zhì)時選擇非極性色譜柱,，分離極性物質(zhì)時選擇極性色譜柱。色譜柱確定后,，根據(jù)樣本中待測組分的分配系數(shù)的差值情況,，確定色譜柱工作溫度，簡單體系采用等溫方式,，分配系數(shù)相差較大的復(fù)雜體系采用程序升溫方式進(jìn)行分析,。
常用的載氣有氫氣、氮?dú)狻⒑獾?。氫氣,、氦氣的分子量較小常作為填充柱色譜的載氣;氮?dú)獾姆肿恿枯^大，常作為毛細(xì)管氣相色譜的載氣;氣相色譜質(zhì)譜用氦氣作為載氣,。
3,、確定初始操作條件
當(dāng)樣品準(zhǔn)備好，且儀器配置確定之后,，就可開始進(jìn)行嘗試性分離,。這時要確定初始分離條件，主要包括進(jìn)樣量,、進(jìn)樣口溫度,、檢測器溫度、色譜柱溫度和載氣流速,。進(jìn)樣量要根據(jù)樣品濃度,、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過10mg/mL時填充柱的進(jìn)樣量通常為1-5uL,，而對于毛細(xì)管柱,，若分流比為50：1時，進(jìn)樣量一般不超過2uL,。進(jìn)樣口溫度主要由樣品的沸點(diǎn)范圍決定,，還要考慮色譜柱的使用溫度。原則上講,，進(jìn)樣口溫度高一些有利,，一般要接近樣品中沸點(diǎn)zui高的組分的沸點(diǎn)，但要低于易分解溫度,。
4,、分離條件優(yōu)化
分離條件優(yōu)化目的就是要在zui短的分析時間內(nèi)達(dá)到符合要求的分離結(jié)果。在改變柱溫和載氣流速也達(dá)不到基線分離的目的時,，就應(yīng)更換更長的色譜柱,，甚至更換不同固定相的色譜柱，因?yàn)樵贕C中,，色譜柱是分離成敗的關(guān)鍵,。
5、定性鑒定
所謂定性鑒定就是確定色譜峰的歸屬,。對于簡單的樣品,，可通過標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照來定性。就是在相同的色譜條件下,，分別注射標(biāo)準(zhǔn)樣品和實(shí)際樣品，根據(jù)保留值即可確定色譜圖上哪個峰是要分析的組分。定性時必須注意,，在同一色譜柱上,，不同化合物可能有相同的保留值，所以,，對未知樣品的定性僅僅用一個保留數(shù)據(jù)是不夠的,，雙柱或多柱保留指數(shù)定性是GC中較為可靠的方法，因?yàn)椴煌幕衔镌诓煌纳V柱上具有相同保留值的幾率要小得多,。條件允許時可采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)機(jī)定性,。
6、定量分析
要確定用什么定量方法來測定待測組分的含量,。常用的色譜定量方法不外乎峰面積(峰高)百分比法,、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法,、外標(biāo)法和標(biāo)準(zhǔn)加入法(又叫疊加法),。峰面積(峰高)百分比法zui簡單，但zui不準(zhǔn)確,。只有樣品由同系物組成,、或者只是為了粗略地定量時該法才是可選擇的。相比而言,，內(nèi)標(biāo)法的定量精度zui高,，因?yàn)樗怯孟鄬τ跇?biāo)準(zhǔn)物(叫內(nèi)標(biāo)物)的響應(yīng)值來定量的，而內(nèi)標(biāo)物要分別加到標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品中,，這樣就可抵消由于操作條件(包括進(jìn)樣量)的波動帶來的誤差,。至于標(biāo)準(zhǔn)加入法，是在未知樣品中定量加入待測物的標(biāo)準(zhǔn)品,，然后根據(jù)峰面積(或峰高)的增加量來進(jìn)行定量計算,。其樣品制備過程與內(nèi)標(biāo)法類似但計算原理則*是來自外標(biāo)法。標(biāo)準(zhǔn)加入法定量精度應(yīng)該介于內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法之間,。
7,、方法的驗(yàn)證
所謂的方法驗(yàn)證，就是要證明所開發(fā)方法的實(shí)用性和可靠性,。實(shí)用性一般指所用儀器配置是否全部可作為商品購得,，樣品處理方法是否簡單易操作，分析時間是否合理,，分析成本是否可被同行接受等,。可靠性則包括定量的線性范圍,、檢測限,、方法回收率,、重復(fù)性、重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度等
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