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樣品準備：

1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。

2）血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用,，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

服務：

我們可以根據(jù)您的應用需要,，比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒,，有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費代測,。僅供科研實驗。

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）,。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）,。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶,。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶,。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶,，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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使用方法：

測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。酶是一種有機催化劑,，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。

TEA Buffer,0.2M,pH8.0  100mL  TEA Buffer,0.2M,pH8.0   常溫保存

TEA Buffer,0.2M,pH8.5  100mL  TEA Buffer,0.2M,pH8.5   常溫保存

TE-LiAc Solution,1X  100mL  TE-LiAc Solution,1X   常溫保存

TES Buffer,0.2M,pH7.0  100mL  TES Buffer,0.2M,pH7.0   常溫保存

TES Buffer,0.2M,pH7.4  100mL  TES Buffer,0.2M,pH7.4   常溫保存

TES Buffer,0.2M,pH8.0  100mL  TES Buffer,0.2M,pH8.0   常溫保存

Thrombin Buffer（緩沖液） 250mL  Thrombin Buffer  常溫保存

Tissue Embedding Reagent  250mL  Tissue Embedding Reagent   常溫保存

Transfer or Electro Blotting Buffer,10X  1000mL  Transfer or Electro Blotting Buffer,10X   常溫保存

Transformation Buffer-1  100mL  Transformation Buffer-1   常溫保存

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