詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),,能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),,提供ROX作為內(nèi)參染料,。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的,、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高,、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng),、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,,提高PCR的準(zhǔn)確性,。
中文名稱:戈氏放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱:Actinomyces gerencseriae
貨號(hào):GOY-M3629
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性,。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好,。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2,、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑,、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物,、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異,。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加,。DNase-Free ddH2O:超純水,,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴(kuò)增,。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸,。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol,。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估,。
4,、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,,后來(lái)也叫Real-Time PCR,,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的,。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加,。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),,收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖,。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期,。在熒光背景信號(hào)階段,,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系,,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段,, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
骨骼肌細(xì)胞25406-64-8氧還原蛋白過(guò)氧化物酶4檢測(cè)試劑盒
表皮角化細(xì)胞256925-92-5氧化型谷胱甘肽檢測(cè)試劑盒
真皮成纖維細(xì)胞2586-96-1氧化高密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒
軟骨細(xì)胞260413-62-5氧化低密度脂蛋白抗體檢測(cè)試劑盒
破骨細(xì)胞26091-79-2氧化低密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒
皮膚肥大細(xì)胞26116-89-2延伸蛋白A檢測(cè)試劑盒
前脂肪細(xì)胞26166-37-0煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸檢測(cè)試劑盒
成骨細(xì)胞26342-66-5煙酰胺腺嘌呤二核苷酸檢測(cè)試劑盒
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞2643-85-8牙骨質(zhì)蛋白1檢測(cè)試劑盒
腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞26544-34-3牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1檢測(cè)試劑盒
腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞26575-93-9循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)試劑盒
腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞26575-95-1血影蛋白檢測(cè)試劑盒
腦膜細(xì)胞2673-40-7血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α檢測(cè)試劑盒7.5%化鈉肉湯顆粒5(6)-CR110, SE [5-(and 6)-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 雞白介素1(IL-1)ELISA Kit
孟加拉紅培養(yǎng)基顆粒5-CR110, SE [5-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit
Half-Fraser顆粒培養(yǎng)基6-CR110, SE [6-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 雞β內(nèi)酰銨酶(β-lactamase)ELISA Kit
Fraser培養(yǎng)基顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA Kit
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 雞α酮戊二酸脫酶(α-KGDHC)ELISA Kit
戈氏放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 雞α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA Kit
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬(wàn)古霉素,(mLST-Vm)顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞α干擾素(IFN-α)ELISA Kit
TCBS瓊脂顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)ELISA Kit
改良EC肉湯(mEC+n)顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)ELISA Kit
EC肉湯顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞Toll樣受體4(TLR4)ELISA Kit
SS瓊脂顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit
堿性蛋白胨水顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞HSP90抗體(IgM)ELISA Kit
3%化鈉堿性蛋白胨水顆粒5(6)-TAMRA, SE [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 雞HSP90抗體(IgG)ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一,。