詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),,能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度,。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料,。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強,、錯配率低等優(yōu)點,。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性,。
中文名稱:禽類支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Avian Mycoplasma spp.
貨號:GOY-M3684
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性,。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase,、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應(yīng)緩沖液,、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應(yīng)時,,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁?、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng),。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異,。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加,。DNase-Free ddH2O:超純水,,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴(kuò)增,。
樣品要求及注意事項:
1,、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,,并用干冰運輸。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol,。
3,、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4,、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息,。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù),。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),,收集一個熒光強度信號,,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖,。
一般而言,,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期,。在熒光背景信號階段,,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,。而在平臺期,,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析,。為了定量和比較的方便,,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
瘦素抗體83-49-8流行性腦脊髓膜炎抗體檢測試劑盒
瘦素受體抗體50656-77-4流感病抗體IgG檢測試劑盒
腸上皮干細(xì)胞蛋白抗體78185-63-4流感B病抗體IgG ELISA試劑盒
鼠抗人促黃體生成素抗體76296-75-8流感B病檢測試劑盒
L-組氨酸脫羧酶抗體 hu, mo, rat, bov, dog, pig, chi76296-75-8流感B病檢測試劑盒
黃體激素釋放激素抗體/促性腺激素釋放激素抗體55916-51-3流感A病抗體IgG ELISA試劑盒
白血病抑制因子抗體19057-67-1流感A病檢測試劑盒
Nogo受體作用蛋白抗體76296-72-5流感A病檢測試劑盒
一種新的凋亡抑制蛋白抗體50773-41-6鱗狀細(xì)胞癌抗原1檢測試劑盒
肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體81917-50-2鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2檢測試劑盒
層粘連蛋白抗體55916-51-3磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C檢測試劑盒
Lpin1 抗體19057-67-1磷酯酶Cγ鏈檢測試劑盒
肺耐藥相關(guān)蛋白抗體55916-51-3磷脂轉(zhuǎn)運蛋白檢測試劑盒腸道菌增菌肉湯Screen Quest™ Fluo-8 Ultra Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines*大鼠E3-RSIκB ELISA Kit
微生物學(xué)接種體肉湯Screen Quest™ Fluo-8 Ultra Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines*大鼠D-乳酸脫酶(D-LDH)ELISA Kit
厭氧培養(yǎng)液Screen Quest™ Fluo-8 Ultra Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines*大鼠D-乳酸ELISA Kit
肝湯Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit大鼠D-甘油醛3-磷酸ELISA Kit
產(chǎn)氣莢膜梭菌測定用培養(yǎng)基Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit大鼠D二聚體(D2D)ELISA Kit
PALCAM肉湯Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit大鼠DNA基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA Kit
緩沖甘油-化鈉溶液Screen Quest™ Fluo-8 Ultra No Wash Calcium Assay Kit 大鼠CXC趨化因子受體5(CXCR5)ELISA Kit
禽類支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒PBS緩沖液(PH7.4)Screen Quest™ Fluo-8 Ultra No Wash Calcium Assay Kit大鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA Kit
乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LS)Screen Quest™ Fluo-8 Ultra No Wash Calcium Assay Kit大鼠c-ros致癌基因1,受體酪氨酸激酶(ROS1)ELISA Kit
哥倫比亞培養(yǎng)基Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* *1 plate*大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)ELISA Kit
7%羊血瓊脂基礎(chǔ)Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* *10 plates*大鼠c-jun ELISA Kit
雙岐桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* *10x10 plates*大鼠CDCP1 ELISA Kit
膽汁肉湯Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *1% FBS Growth Medium* *1 plate*大鼠CD68分子(CD68)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,,實驗優(yōu)化簡單
缺點:對每一個基因,,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線,;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一,。