詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度,。同時,,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,,能更靈敏的,、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高,、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng),、錯配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,,提高PCR的準(zhǔn)確性,。
中文名稱:馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Arthrobacter equi
貨號:GOY-M3673
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性,。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好,。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2,、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑,、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物,、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI,、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加,。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng),。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增,。
樣品要求及注意事項:
1,、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,,并用干冰運(yùn)輸。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3,、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估,。
4、 實(shí)時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息,。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù),。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的,。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加,。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段,, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析,。為了定量和比較的方便,,在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
抗眼鏡蛇蛇蛋白抗體57-88-5牛奶過敏原特異性IgE抗體ELISA試劑盒
下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體20830-75-5牛兒基焦磷酸合酶檢測試劑盒
胰高血糖素樣肽-1抗體21293-29-8凝血因子XIIIB鏈檢測試劑盒
胰高血糖素樣肽-2抗體77-06-5凝血因子XIII A1檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體67-03-8凝血因子VIII檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體83-88-5凝血因子Ⅻ檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體59-30-3凝血因子ⅩⅢ檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體303-98-0凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原檢測試劑盒
風(fēng)疹病糖蛋白抗體145-13-1凝血因子Ⅶ檢測試劑盒
結(jié)腸癌抗原糖蛋白A33抗體58-22-0凝血因子Ⅴ檢測試劑盒
磷脂?;嫉鞍拙厶?3抗體50-23-7凝血因子Ⅱ檢測試劑盒
糖皮質(zhì)激素受體抗體600-57-7凝血酶原前體蛋白檢測試劑盒
G蛋白偶合受體激酶1抗體57-83-0凝血酶原片段F1+2檢測試劑盒PPLO瓊脂ReadiLink™ KLH Conjugation Kit *For antibody development*大鼠二銨氧化酶(DAO)ELISA Kit
葡萄糖肉湯ReadiLink™ FITC Protein Labeling Kit大鼠兒茶酚抑素(CST)ELISA Kit
液體培養(yǎng)基ReadiLink™ Protein Biotinylation Kit *Powered by Biotin Visionization Technology*大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)ELISA Kit
麥芽汁瓊脂ReadiLink™ Protein Thiolation Kit大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)ELISA Kit
Preston肉湯基礎(chǔ)Amplite™ Fluorimetric Maleimide Quantitation Kit *Green Fluorescence*大鼠多巴銨D2受體配體(D2RL)ELISA Kit
YM培養(yǎng)基Amplite™ Fluorimetric Thiol Quantitation Assay Kit *Green Fluorescence*大鼠對氧磷酶1(PON1)ELISA Kit
布氏肉湯添加劑Amplite™ Colorimetric Maleimide Quantitation Kit大鼠蕈堿型酰膽堿受體(M-AChR)ELISA Kit
馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒WLN培養(yǎng)基ProLite™ Colorimetric Protein Quantitation Kit *5-500 µg/mL Dynamic Range*大鼠頂體蛋白(ACR)ELISA Kit
梭菌屬測定用培養(yǎng)基ProLite™ Fluorimetric Protein Quantitation Kit *10-1000 ng/mL Dynamic Range*大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA Kit
化鈉營養(yǎng)瓊脂Amplite™ Colorimetric Aldehyde Quantitation Kit大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)ELISA Kit
小肉湯培養(yǎng)基Amplite™ Fluorimetric Fluorescamine Protein Quantitation Kit *Blue Fluorescence*大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA Kit
硫酸慶大霉素Amplite™ Colorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit大鼠抵抗素樣α(Retnla)ELISA Kit
含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板Amplite™ Fluorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit *Green Fluorescence*大鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡單,,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡單
缺點(diǎn):對每一個基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線,;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一,。