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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：20T/100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
保存條件：-20℃冰凍保存一年,。 工作原理： 在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成,。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時(shí)間也很短暫,。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活,，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,，并產(chǎn)生 與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端,。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié) 合在 DNA 斷點(diǎn)部位,，可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,，再結(jié)合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化,，在 568-574nm 發(fā)射熒光,，呈鮮紅色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞,。 試劑盒內(nèi)容： 1．標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml 2．末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl 3．DIG-dUTP(×20)20μl 4．封閉液(Blocking Reagent)4ml 5．生物素化抗抗體(× 100)20μl 6．SABC-CY3(× 100)20μl 7．Proteinase K(×200)50μl 8 抗體稀釋液 4ml |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究,；
③細(xì)胞骨架體系的研究,；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
叉頭框蛋白O3(FOXO3)英文名稱：FOXO3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體包裝1g
叉頭框蛋白M1(FOXM1)英文名稱：FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146抗體包裝5g
叉頭框蛋白A2(FOXA2)英文名稱：FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體包裝1g
層粘連蛋白β1(LAMβ1)英文名稱：LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體包裝250mg
層粘連蛋白α1(LAMα1)英文名稱：LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g
補(bǔ)體因子D(CFD)英文名稱：CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g
補(bǔ)體因子B(CFB)英文名稱：CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5a受體1(C5aR1)英文名稱：C5aR1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框149抗體包裝25g
補(bǔ)體成分5a(C5a)英文名稱：C5a ELISA Kit碳化合物激結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5(C5)英文名稱：C5 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4b(C4b)英文名稱：C4b ELISA Kit補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g
補(bǔ)體成分4a(C4a)英文名稱：C4a ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框62抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4(C4)英文名稱：C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分3(C3)英文名稱：C3 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框46抗體包裝1g
補(bǔ)體3a(C3a)英文名稱：C3a ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框103抗體包裝25g
鯊魚弧菌Vibrio│carchariae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine
沙門氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定幽門螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G,；so
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)釀酒酵母 利福霉SApat-1Elisa
松針散斑殼 3,4-二溴吡啶克氏錐蟲Elisa
枯草芽孢桿 (R)-2-甲基吡咯烷鹽酸鹽溶Elisa
深紅酵母 4-甲基-5-甲氧基-1,2,4-三唑啉-3-酮凋亡激活因子Elisa
微白類諾卡氏 (1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲支鏈氨基酸Elisa
凱斯特鞘氨單胞 4-氟間苯二肝糖原Elisa
尖角凸臍蠕孢 鹽酸沙格雷酯PPP1CaElisa
薔薇生鏈格孢 2-甲基硫代酰幽門螺桿IgG抗體Elisa
假單胞屬 4-芐基-2-嗎琳羧酸鹽酸鹽蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移1Elisa
Microterricola viridarii (S)-N-Boc-2-羥甲基嗎啉分泌型卷曲相關(guān)蛋白1Elisa
蘇云金芽孢桿 (R)-N-Boc-2-羥甲基嗎啉Dickkopf 3Elisa
膠孢 4-Boc-2-羥甲基嗎啉CTXIIIElisa
孢吸水鏈霉昆明變種 3-氯-4-苯5α-雙氫睪酮 Elisa
pYES3/CT 3-氯-6-噠性別決定區(qū)Y蛋白Elisa
青霉（加詞待譯） 4-羥基環(huán)己酮腎綜合征出血熱病抗體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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