詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度,。同時,,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,,能更靈敏的,、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強,、錯配率低等優(yōu)點,。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性,。
中文名稱:胰闊圓盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Eurytrema pancreaticum
貨號:GOY-M3993
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,,90℃以上 2min 后具有擴增活性,,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,,且重復(fù)性好,。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase,、MgCl2,、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液,、PCR反應(yīng)增強劑,、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應(yīng)時,,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng),。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI,、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異,。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴增,。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,,實驗材料必須保證新鮮,,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol,。
3,、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4,、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息,。熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù),。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),,收集一個熒光強度信號,,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖,。
一般而言,,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期,。在熒光背景信號階段,,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,。而在平臺期,,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,,我們可以選擇在這個階段進行定量分析,。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
正胺Stemolecule™ IPA-3免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
華蟾它靈Stemolecule™ IDE-2免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
香豆素Stemolecule™ IDE-1免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
氨酸Stemolecule™ GSK429286A免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
西瑞香素Stemolecule™ Forskolin免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
右旋四巴馬汀Stemolecule™ Epigenetic Modifier Set免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
環(huán)氧續(xù)隨子醇Stemolecule™ Doxycycline hyclate免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
富馬酸Stemolecule™ Dorsomorphin免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
黃豆黃苷Stemolecule™ Dexamethasone免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
巨大戟醇Stemolecule?™ DAPT血管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
胰闊圓盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒肌醇Stemolecule™ Cyclopamine血管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
異甘草苷Stemolecule™ Cyclic Pifithrin-α血管細胞粘附分子1(VCAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
左旋肉堿Stemolecule™ CHIR99021巨噬細胞炎性蛋白5(MIP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)弓形蟲抗體 IgM(捕獲法一步法) 6-Epiharpagide
N-Glycyl-L-leucineRabbit CK-HMW (Cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit
弓形蟲抗體 IgM(捕獲法二步法) 6-Deoxy-9α-hydroxycedrodorin
N-Phenylanthranilic acidRabbit HMGCS1 (3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-Coenzyme A Synthase 1) ELISA Kit
單純皰疹Ⅰ型病 IgG(間接法二步法) 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranos
NARabbit ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit
單純皰疹Ⅰ型病 IgM(間接法二步法) 6,8-Diprenylorobol
Ethyl N-benzoyl-L-argininate hydrochlorideRabbit GPR37 (G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit
單純皰疹Ⅰ型病 IgM(捕獲法一步法) 5β-Hydroxycostic acid
N-Carbobenzyloxy-L-alanineRabbit MUC5AC (Mucin 5 Subtype AC) ELISA Kit
單純皰疹Ⅰ型病 IgM(捕獲法二步法) 5α-Hydroxycostic acid
N-Carbobenzyloxy-L-glutamineRabbit N-MID-OT (N-MID Osteocalcin) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,,每一輪實驗都必需做標(biāo)準曲線;必需有固定的標(biāo)準品做標(biāo)準曲線,;這些標(biāo)準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一,。