詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度,。同時,,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,,能更靈敏的,、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高,、特異性擴增能力強,、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,,提高PCR的準(zhǔn)確性,。
中文名稱:新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Francisella novicida
貨號:GOY-M4021
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性,。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好,。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2,、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑,、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物,、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI,、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加,。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng),。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1,、 如果提供實驗材料,,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,,并用干冰運輸,。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol,。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估,。
4,、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,,后來也叫Real-Time PCR,,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的,。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加,。每經(jīng)過一個循環(huán),,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,,從而得到一條熒光擴增曲線圖,。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期,。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段,, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析,。為了定量和比較的方便,,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
蒼術(shù)苷Afrozen纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
桃葉珊瑚苷Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..骨鈣素(OC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
橙黃決明素Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..補體成分5(C5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
扁蓄苷frozenS100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
阿奇霉素Dictyostelium purpureum Olive轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
黃芩素Aspergillus flavus Link凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
黃芩苷Sordaria macrospora Auerswald腦鈉素(BNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
補骨脂酚Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..三磷酸肌醇(IP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
寶藿苷ⅠMucilaginibacter paludisI/腫瘤壞死因子β(TNFβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
蘆薈苷Homo sapiens, human免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
補骨脂二黃酮醚 Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..磷新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
貝萼皂苷元Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..二?;视?DAG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
龍膽山酮酚Corynebacterium pseudodiphtheriticum Lehman ..白介素18(IL18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)兔可溶性凋亡相關(guān)因子 Trichokaurin
Deoxythymidine triphosphateRabbit Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit
人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子 Tetrahydrolachnophyllum lactone
Cytidylic acidRabbit GPI (Glycophosphatidylinositol) ELISA Kit
兔6酮前列腺素F1a Tetrachyrin
NARabbit CD99 (Cluster of Differentiation 99) ELISA Kit
小鼠肌鈣蛋白T 繡線菊堿 F
CI 42755Rabbit PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit
大鼠吡啶酚 Spegatrine
Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)-phosphonium hexafluorophosphateRabbit HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit
麥胚凝集素/凝集蛋白 Sequosempervirin B
NARabbit TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線,;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一,。