詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統(tǒng),,能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時,,提供ROX作為內參染料,。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍,能更靈敏的,、更直觀的反應目的模板DNA的濃度,。產品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高,、特異性擴增能力強,、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,,提高PCR的準確性,。
中文名稱:瑪爾摩分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium malmoenes
貨號:GOY-M4241
規(guī)格:50T
產品特性: 高特異性:本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,,可大大提高 PCR 產物的特 異性,。 靈敏度:本產品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板,,且重復性好。 高適用性:本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase,、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應緩沖液,、PCR反應增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應時,,只需將適當的裂解混合液、引物,、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應,。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異,。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加,。DNase-Free ddH2O:超純水,,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴增,。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,,實驗材料必須保證新鮮,,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸,。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3,、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估,。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息,。熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,,后來也叫Real-Time PCR,,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的,。其原理:隨著PCR反應的進行,,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加,。每經過一個循環(huán),,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化,,從而得到一條熒光擴增曲線圖,。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,,熒光信號指數擴增階段和平臺期,。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,,無法判斷產物量的變化,。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段,, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值,。
以下是公司正在熱銷的產品:
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白頭翁皂苷E-357-88-5多肽-N-酰氨基半乳糖轉移酶2(GALNT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
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白土苓(華南肖菝葜)(標準品)81-25-4多肽-N-酰氨基半乳糖轉移酶4(GALNT4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
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瑪爾摩分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Chromogenic Salmonella Agar BaseGuinea pig D2R/DRD2 (Dopamine Receptor D2) ELISA Kit
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Soda asbestos;AscariteGuinea pig TFR/CD71 (Transferrin Receptor) ELISA Kit
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小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM 磷酸銨
ARSENIC ACIDGuinea pig TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產品僅用于科研
缺點:對每一個基因,,每一輪實驗都必需做標準曲線,;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一,。