商品介紹:
CYC065是第二代有效的ATP競爭性的CDK2/CDK9激酶抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1070790-89-4 純度:98.58% 分子量:397.52 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK2/CDK9激酶抑制劑(CYC065)
英文名稱:CYC065
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
熒光假單胞菌雙氫睪偶聯(lián)血藍蛋白Anti-GPR158 Antibody人血管緊張Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)
產(chǎn)氣腸桿菌己烯雌偶聯(lián)血藍蛋白Anti-GPR171 Antibody人血管緊張Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)
球孢白僵菌雙氫睪偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR171 Antibody人血管緊張Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)
葡萄座腔菌2,4-二氧乙偶聯(lián)血藍蛋白Anti-GPR160 Antibody人血管緊張Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)
長隱球酵母多價重組人登革熱病診斷抗原Anti-GPR173 Antibody人血管緊張Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)
大腸埃希菌異常凝血原/脫-γ-羧基凝血原抗原Anti-GPR173 Antibody人血管緊張Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)
惡臭假單胞菌腸道病71型/手足口病病抗原Anti-GPR176 Antibody人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)
球孢白僵菌重組人表皮生長因子Anti-GPR180 Antibody人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)
多欄純潔桿菌表皮生長因子多肽Anti-GPR174 Antibody人抗鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)
廣食黃桿菌上皮粘附分子/表皮粘附分子Anti-GPR180 Antibody人抗鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)
人參布哈加瓦氏菌上皮粘附分子/表皮粘附分子抗原Anti-GPR19 Antibody人甲狀腺肽激抗體(THAA)
成團泛菌雌二偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR25 Antibody人甲狀腺肽激抗體(THAA)
球毛殼骨骼肌烯化多肽Anti-GPR20 Antibody人抗類固生成抗體(SCA)
釀酒酵母表皮生長因子受體3(抗原)Anti-GPR22 Antibody人抗類固生成抗體(SCA)
豇豆慢生根瘤菌雌激受體Anti-GPR27 Antibody人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)
雞傷寒沙門氏菌雌激受體(多肽抗原)Anti-GPR32 Antibody人粒特異性抗核抗體(GS-ANA)
絲消旋德氏乳桿菌保加亞亞種小鼠肝星形細胞
墨蝶蛉還原抗體醋菌人永生化角質(zhì)形成細胞
嗅覺神經(jīng)相關蛋白STOML3抗體發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)人乳腺導管癌細胞
尿轉(zhuǎn)運型糖蛋白A2抗體植物乳桿菌人毛囊角質(zhì)細胞
CDK2/CDK9激酶抑制劑(CYC065)螯合球 中性樹膠
平菇 柯柏膠
紫色紅曲霉 蟲膠
斯克爾曼氏 山達膠
粉紅聚端孢霉 乳香膠
波特枝頂孢 但馬膠
大蟬草 橄欖油
乳粉 蠟樣芽胞桿(定量) 香柏油
麥根腐平臍蠕孢 蜂蠟
北京棒桿 草酸鎳
石莼海 二氧化硅
莫氏屬 偶氮胂Ⅲ
阿德長西氏酵母 偶氮胂Ⅰ
氈毛栓孔 4-叔丁基茴香
殼 硬脂酸鋁