商品介紹:
Targocil可用作磷壁酸(WTA)生物合成的抑菌抑制劑,,可抑制甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的生長(zhǎng),對(duì)于MRSA和MSSA的MIC90值都為2μg/mL,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1200443-21-5 分子量:475.95 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
異佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZIDOETHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE型肝炎病非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體包裝500g
異甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clemastine fumarateNoxa蛋白抗體包裝1g
異甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clemastine fumarateP53誘導(dǎo)凋亡抑制蛋白抗體包裝5g
異橄欖樹脂英文名稱: Ketotifen fumarate磷化酪激B抗體包裝1g
異杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖(1-4)-...英文名稱: 2-Oxohexamethylenimine磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝250mg
異鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benproperine phosphate磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝100g
異葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Minoxidil線粒體復(fù)合物NDUFS4蛋白抗體包裝25g
異槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Hydroxy-4-methylcoumarinNADH脫氫α家族8抗體包裝500g
異黃腐英文名稱: 7-Hydroxy-4-methylcoumarinNADH脫氫黃蛋白1抗體包裝1g
異黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Testosterone undecanoateNADH脫氫黃蛋白2抗體包裝5g
異黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DipyridamoleNADH氧化還原輔1抗體包裝1g
異黃芪皂苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: S-Carboxymethyl-L-cysteine膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體包裝5g
異茴芹內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isosorbide dinitrate磷化谷受體2B抗體包裝1g
異苦參英文名稱: Laurocapram磷化谷受體2A+2B抗體包裝5g
異類葉升麻苷;異毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxymetazoline hydrochloride高度相似的周期蛋白激NEK6抗體包裝1g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品堿性胎兒蛋白試劑盒次野鳶尾黃;Irisflorentin
黑木耳Auricularia│auricula 質(zhì)量規(guī)格:>99%,鹽鹽堿性磷試劑盒穿琥寧;Kalii Dehydrogra
鼠李糖乳桿菌Lactobacillus│rhamnosus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品堿性亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白試劑盒芒柄花;Formononetin
MSSA和MRSA抑制劑(Targocil)腫瘤抑制因P53蛋白抗體(野生型P53)醋磺米 Potassium trichloroammineplatinate(II)
腫瘤抑制因p63α抗體醋優(yōu)力司特,;醋烏利司他 Sisomicin
磷二酯4A8抗體醋增血壓 spectinomycin
血小板源性生長(zhǎng)因子AB+BB抗體地克珠利 5-MTHF,;5-Methyltetrahydrofolic Acid Calcium Salt Trihydrate
增殖核抗原抗體地拉考昔 Kitasamycin
腦特異性多肽蛋白19抗體地拉羅司,去鐵斯若 josamycin
三磷腺苷門控陽(yáng)離子通道蛋白抗體地馬格列 Midecamycin Acetate
硫氧還蛋白過(guò)氧化物Ⅱ/巰抗氧化蛋白抗體地美司鈉 Etimicin
p53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22抗體地美溴 Paromomycin