詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),,能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度,。同時(shí),,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn),。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,,提高PCR的準(zhǔn)確性,。
中文名稱:熊源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱:詳見說(shuō)明書
貨號(hào):GOY-M4726
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性,。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,,且重復(fù)性好,。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase,、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應(yīng)緩沖液,、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑,、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物,、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng),。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異,。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴(kuò)增,。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸,。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol,。
3,、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估,。
4,、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息,。熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來(lái)也叫Real-Time PCR,,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù),。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的,。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),,熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),,收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖,。
一般而言,,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段,, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析,。為了定量和比較的方便,,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
兔IgG-兔IgGRecombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgM)ELISA Kit
鼠IgG-鼠IgGRecombinant Intelectin 1 (ITLN1)牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgG)ELISA Kit
藍(lán)色預(yù)染中分子量蛋白MarkerRecombinant Endothelin 1 (EDN1)牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit
藍(lán)色預(yù)染高分子量蛋白MarkerRecombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)牛窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA Kit
可視型中分子量蛋白MarkerRecombinant Endoglin (ENG)牛降鈣素(CALCA/CALC)ELISA Kit
可視型藍(lán)色預(yù)染中分子量蛋白MarkerRecombinant TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2)牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子2(FGF2)ELISA Kit
考馬斯亮藍(lán)R-250Recombinant Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3)牛狀腺素(T4)ELISA Kit
考馬斯亮藍(lán)G-250Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)牛狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA Kit
廣譜彩虹預(yù)染蛋白MarkerRecombinant Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)牛肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA Kit
甘氨酸Recombinant Visfatin (VF)牛肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)ELISA Kit
定影粉Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3)?;罨谹(ACV-A)ELISA Kit
蛋白銀染試劑盒Recombinant Neuroglobin (NGB)牛黃體生成素(LH)ELISA Kit
蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-BSARecombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)牛環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit1,7-DibroMoheptane;HeptaMethylene dibroMide 甘氨酸培養(yǎng)基
熊源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒TETRAPHENYLARSONIUM CHLORIDE HYDROCHLORIDE DIHYDRATE, 97Chicken GIP (Gastric Inhibitory Polypeptide) ELISA Kit
1,8-DibroMo octane;OctaMethylene dibroMide;OctaMethylene broMide 烯葡聚糖凝膠S-500 HR
Ropivacaine hydrochlorideChicken MART/Melan-A (Melanoma Marker A) ELISA Kit
1,9-DibroMononane;NonaMethylene dibroMide;NonaMethylene broMide 烯葡聚糖凝膠S-400 HR
2,6-DIMETHYLANILINE HYDROCHLORIDEChicken TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit
10-ForMylfolic Acid 烯葡聚糖凝膠S-300 HR
ROPIVACAINE RELATED COMPOUND B (50 MG) ((R)-(+)-1 -PROPYLPIPERIDINE-2-CARBOXYLIC ACID (2,6-DIMETHYLPHENYL)-AMIDE HYDROCHLORIDE MONOHYDRATE)Chicken CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit
10-Hydroxydecanoic acid 烯葡聚糖凝膠S-200 HR
MabuterolhydrochlorideChicken SEP1 (Selenoprotein 1) ELISA Kit
11-Aminoundecanoic acid TTC瓊脂基礎(chǔ)
MitoxantroneChicken ITLN1 (Intelectin 1/Omentin) ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線,;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一,。